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內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠
英文名稱:Endotoxin Removal Reagent Berpharose Fast Flow
貨號(hào):B2820
規(guī)格:10ml
1.產(chǎn)品介紹
本公司生產(chǎn)的內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠FF,可以特異去除病毒,核酸和蛋白等樣品中的內(nèi)毒素。本產(chǎn)品具有剛性好,特異性強(qiáng),載量高,穩(wěn)定性好,樣品回收率高等特點(diǎn)。
本產(chǎn)品直接加入到樣品中進(jìn)行內(nèi)毒素清除,不必裝柱,使用方便,有效,利于放大生產(chǎn),此外在使用過程中配基不脫落,安全可靠,可以重復(fù)使用。 處理后的樣品內(nèi)毒素含量可以小于0.1EU/mg
2.規(guī)格
10ml、25ml、100ml、500ml、1L 使用方法
緩沖液配制:
再生液:1%脫氧膽酸鈉、20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
(稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、脫氧膽酸鈉
5.0g、加注射用水溶解,定容至500ml)
平衡液:20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
(稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、加注射用水
溶解,定容至500ml)
實(shí)驗(yàn)步驟:
再生:用1-2倍填料體積的再生液抽洗,再用3-5倍填料體積的再生液將凝膠充分混勻,
保持 10min。
平衡:用5-10倍填料體積的平衡液,對(duì)填料進(jìn)行平衡,重復(fù)5-10次。
上樣:(1)直接混合法:
①根據(jù)樣品溶液中內(nèi)毒素的含量加入一定量經(jīng)上述預(yù)處理好的填料,于三角瓶中 4℃、150rpm振蕩,直至充分去除內(nèi)毒素。
② 將以上樣品無菌過濾,測內(nèi)毒素含量。
(2)過柱法:
①將經(jīng)上述預(yù)處理好的填料裝填到色譜柱中
②流速控制在0.25ml/min左右上樣,把流穿的樣品液,再次加入到上樣液中,循環(huán)上樣,直至充分去除內(nèi)毒素。
注:由于有時(shí)候內(nèi)毒素和樣品的結(jié)合,需要較長時(shí)間去除,因此通常情況下直接混勻法優(yōu)于過柱法。
5.注意事項(xiàng):
(1)各操作中樣品、填料接觸到的全部儀器設(shè)備耗材均應(yīng)為無熱源(無內(nèi)毒素)。
(2)0.2µm 濾膜要用 0.1M NaOH 浸泡過夜后,121℃高壓滅菌30min。
(3)脫氧膽酸鈉溶液低溫容易成胨狀,使用時(shí)溫度可以到30℃,避免流不動(dòng)堵柱子或漏斗。
(4)該親和填料每次使用前都需進(jìn)行填料再生步驟。
(5)配制緩沖液要用無內(nèi)毒素的注射級(jí)用水,配制過程要防止引入內(nèi)毒素。
(6)適當(dāng)延長填料與樣品溶液的處理時(shí)間可以加大內(nèi)毒素的吸附量。
(7)如需使用磁力攪拌要注意轉(zhuǎn)速別太快,避免填料顆粒破碎。
(8)樣品如果本身是帶負(fù)性電荷,為增加樣品回收率,樣品中可以加≤0.2M NaCl。
(9)樣品 pH7-9范圍內(nèi)。
(10)樣品內(nèi)毒素太高,超過填料處理量,需要稀釋樣品找到內(nèi)毒素的范圍,和經(jīng)去除后內(nèi)毒素的范圍對(duì)照,就可以知道效果,如果一次去除不完-全,可以重復(fù),直到合格為止。
(11)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4~8℃。
(12)2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸。
(13)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
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