小鼠腎炎模型誘導(dǎo)-陽離子牛血清白蛋白(cBSA)
免疫復(fù)合物腎小球腎炎(IGGN)模型簡介:
腎小球腎炎是指一系列由免疫應(yīng)答介導(dǎo)的導(dǎo)致腎小球炎癥。膜性腎病和膜性腎小球腎炎是人類腎病綜合征常見的病因。膜性腎病的特征是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積,導(dǎo)致基底膜增厚激活補(bǔ)體。激活的炎癥級(jí)聯(lián)導(dǎo)致腎功能受損,包括蛋白尿和腎功能衰竭。有研究報(bào)道用大鼠膜性腎病模型(Heymann腎炎),研究人膜性腎病,盡管Heymann腎炎覆蓋了人膜性腎炎的很多方面,但是使用大鼠作模型有很多缺點(diǎn)。小鼠膜性腎炎模型是研究膜性腎病發(fā)病機(jī)制和開發(fā)靶向治療的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可誘導(dǎo)兔膜性腎病癥狀。另外,已有研究用cBSA在狗、貓、兔等動(dòng)物成功誘導(dǎo)免疫復(fù)合物腎小球腎炎模型。Chen et al,將這一模型用于小鼠,稱為:免疫復(fù)合物腎小球腎炎(IGGN)模型。
人的膜性腎病是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積而引起的。沉積的免疫復(fù)合物激活補(bǔ)體,導(dǎo)致基底膜變厚。對(duì)于小鼠ICGN模型,用cBSA反復(fù)免疫小鼠。帶正電荷的cBSA與帶負(fù)電荷的基底膜(GBM)結(jié)合???/span>cBSA抗體(主要是IgG1)與cBSA產(chǎn)生的免疫復(fù)合物,導(dǎo)致人膜性腎病出現(xiàn)多種癥狀,如:基底膜增厚,低蛋白血癥和蛋白尿。這種發(fā)病機(jī)制,同樣適用在兒童膜性腎病。
操作流程:
動(dòng)物品系:
Balb/c and ICR小鼠(≥7-8周齡,雄性或雌性都可以),C57BL/6小鼠不能誘導(dǎo)產(chǎn)生該模型。
乳劑制備:
用cBSA和*弗氏佐劑(cat#7008, 1mg/ml)等體積混合
注意:
制備乳劑后請(qǐng)檢測(cè)乳劑質(zhì)量,滴一滴到水中不擴(kuò)散,說明乳劑質(zhì)量良好,反之,重新混勻,直到為油包水狀態(tài)。
免疫方法
小鼠尾根部皮下免疫100ul乳劑(cBSA 0.1mg)
腎炎誘導(dǎo)
2周后,靜脈注射200ul(400ug) cBSA(2 mg/ml),每隔一天重復(fù)免疫,一共免疫5次。
注意
靜脈注射cBSA,導(dǎo)致小鼠過敏反應(yīng),有可能會(huì)導(dǎo)致小鼠死亡。為了避免這種情況發(fā)生,*免疫劑量要小一些(50-100ug cBSA),在隨后的2-5次免疫逐漸增加劑量到400ug。
腎炎評(píng)估:
通過檢測(cè)小鼠16小時(shí)尿中尿蛋白含量評(píng)價(jià)腎炎嚴(yán)重程度。推薦使用chondrex 公司小鼠白蛋白檢測(cè)試劑盒(cat#3012)
相關(guān)產(chǎn)品:
貨號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
9058 | 陽離子牛血清白蛋白 | Cationic Bovine Serum Albumin (cBSA) | 20mg |
7008 | *弗氏佐劑 | Complete Freund's Adjuvant,1mg/ml | 5ml |
3012 | 小鼠白蛋白檢測(cè)試劑盒 | Mouse Albumin Detection Kit | 1Kit |
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