蛋白分中蛋白質的檢測
蛋白芬中蛋白質的檢測
蛋白質是蛋白芬質量的一個重要的檢測指標,目前蛋白質檢測化學方法主要有凱氏定氮法、杜馬斯燃燒法、雙縮脲法、福林(Folin)——酚試劑法等。其中在食品領域以凱氏定氮法zui為常用,本文主要是使用凱氏定氮儀測定樣品含量。
1 實驗部分
1.1 儀器和試劑
K1100F凱氏定氮儀;SH420石墨消解儀;萬分之一電子天平;
濃硫酸(98%);催化劑片(硫酸銅和硫酸鉀);40%氫氧化鈉;2%硼酸;0.0500mol/l硫酸標準滴定溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑;
1.2 方法
1.2.1 稱樣:三個樣品,分別稱取濃縮蛋白芬0.3000g,分離蛋白分0.2000g,乳品蛋白芬0.2000g(區(qū)別在于三者工藝不同),連同無灰濾紙一起放于消化管中。每個消化管中再分別加入1片催化劑片,8ml濃硫酸。同時做空白。
1.2.2 消解 :將樣品放于消解儀上,蓋好排廢罩,打開冷凝水。蛋白芬樣品消解過程不易上沖,所以采用直線升溫,直接設定消解溫度420,消解時間90min。
1.2.3 蒸餾 滴定:消解冷卻好的樣品,放于定氮儀,設置好相應參數(shù),直接測試,儀器自動計算結果并打印數(shù)據(jù)。
2數(shù)據(jù)與分析
乳品蛋白 | 編號 | 質量 | 蛋白質(%) | RSD(%) |
1 | 0.1933 | 88.5139 | 0.24 | |
2 | 0.1944 | 88.4623 | ||
3 | 0.1989 | 88.2640 | ||
4 | 0.1916 | 88.0859 | ||
5 | 0.1955 | 88.1442 | ||
6 | 0.1928 | 87.9907 | ||
分離蛋白 | 7 | 0.1967 | 84.5636 | 0.22 |
8 | 0.1962 | 84.0422 | ||
9 | 0.1969 | 84.3040 | ||
10 | 0.1945 | 84.3363 | ||
11 | 0.1926 | 84.4842 | ||
12 | 0.1950 | 84.4784 | ||
濃縮蛋白 | 13 | 0.3000 | 60.7893 | 0.34 |
14 | 0.3016 | 60.9002 | ||
15 | 0.3002 | 60.8921 | ||
16 | 0.3056 | 60.3924 | ||
17 | 0.3020 | 60.5860 | ||
18 | 0.2988 | 60.8959 |
乳品蛋白、分離蛋白、濃縮蛋白的RSD(%)依次為0.24、0.22,、0.34,重復性較好。
3結論
鑒于上述結果,用凱氏定氮儀測定蛋白芬比較簡便,重復性也好。