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          蛋白分中蛋白質的檢測

          閱讀:2159        發(fā)布時間:2016-4-15

          蛋白芬中蛋白質的檢測

           蛋白質是蛋白芬質量的一個重要的檢測指標,目前蛋白質檢測化學方法主要有凱氏定氮法、杜馬斯燃燒法、雙縮脲法、福林(Folin)——酚試劑法等。其中在食品領域以凱氏定氮法zui為常用,本文主要是使用凱氏定氮儀測定樣品含量。

          1 實驗部分

          1.1   儀器和試劑

          K1100F凱氏定氮儀;SH420石墨消解儀;萬分之一電子天平;

          濃硫酸(98%);催化劑片(硫酸銅和硫酸鉀);40%氫氧化鈉;2%硼酸;0.0500mol/l硫酸標準滴定溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑;

          1.2   方法

          1.2.1          稱樣:三個樣品,分別稱取濃縮蛋白芬0.3000g,分離蛋白分0.2000g,乳品蛋白芬0.2000g(區(qū)別在于三者工藝不同),連同無灰濾紙一起放于消化管中。每個消化管中再分別加入1片催化劑片,8ml濃硫酸。同時做空白。

           

          1.2.2          消解 :將樣品放于消解儀上,蓋好排廢罩,打開冷凝水。蛋白芬樣品消解過程不易上沖,所以采用直線升溫,直接設定消解溫度420,消解時間90min。

          1.2.3          蒸餾 滴定:消解冷卻好的樣品,放于定氮儀,設置好相應參數(shù),直接測試,儀器自動計算結果并打印數(shù)據(jù)。

           

           

          2數(shù)據(jù)與分析

          乳品蛋白

          編號

          質量

          蛋白質(%)

          RSD(%)

          1

          0.1933

          88.5139

          0.24

          2

          0.1944

          88.4623

          3

          0.1989

          88.2640

          4

          0.1916

          88.0859

          5

          0.1955

          88.1442

          6

          0.1928

          87.9907

          分離蛋白

          7

          0.1967

          84.5636

          0.22

          8

          0.1962

          84.0422

          9

          0.1969

          84.3040

          10

          0.1945

          84.3363

          11

          0.1926

          84.4842

          12

          0.1950

          84.4784

          濃縮蛋白

          13

          0.3000

          60.7893

          0.34

          14

          0.3016

          60.9002

          15

          0.3002

          60.8921

          16

          0.3056

          60.3924

          17

          0.3020

          60.5860

          18

          0.2988

          60.8959

          乳品蛋白、分離蛋白、濃縮蛋白的RSD(%)依次為0.24、0.22,、0.34,重復性較好。

          3結論

          鑒于上述結果,用凱氏定氮儀測定蛋白芬比較簡便,重復性也好。

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