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　　幾種常用溶液濃度的表示法

　　(1)質(zhì)量百分比濃度：用溶質(zhì)的質(zhì)量占全部溶液質(zhì)量的百分比來表示的濃度。簡(jiǎn)稱百分濃度。

　　(2)體積百分比濃度：用溶質(zhì)的質(zhì)量占溶劑體積的百分比來表示的濃度。在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常用這種濃度。

　　(3)體積比濃度：液體試劑相互混和或液體試劑用水稀釋時(shí)常用此法。例如，1∶3酒精溶液指的是1體積的酒精和3體積的蒸餾水混和而成的酒精水溶液，1∶3中的前一個(gè)數(shù)字指的是溶質(zhì)的體積數(shù)，后一個(gè)數(shù)字指的是溶劑的體積數(shù)。

　　(4)物質(zhì)的量濃度：用1升溶液里含有溶質(zhì)的量來表示的溶液濃度。目前習(xí)慣稱摩爾濃度，用M表示。

　　(5)當(dāng)量濃度：用每升溶液里所含溶質(zhì)的克當(dāng)量數(shù)表示的濃度。通常用N表示。

　　常用酸、堿、鹽溶液的配制

　　1.酸溶液

　　2.堿溶液

　　3.鹽溶液

　　常用溶液配制方法

　　30%丙烯酰胺溶液

　　【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補(bǔ)加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器(0.45μm孔徑)過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫。

　　【注意】丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具。可認(rèn)為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)樗€可能會(huì)含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂(MB-1Mallinckrodt)，攪拌過夜，然后用Whatman 1號(hào)濾紙過濾以純化之。在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會(huì)緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。

　　40%丙烯酰胺

　　【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA測(cè)序級(jí))和20g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L。

　　【注意】見上述配制30%丙烯酰胺的說明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測(cè)定。

　　放線菌素D溶液

　　【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對(duì)照讀取OD440值。放線菌素D(分子量為1255)純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21，900，故而1mg/ml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182，放線菌素D的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中，保存于-20℃。

　　【注意】放線菌素D是致畸劑和致癌劑，配制該溶液時(shí)必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，而不能在開放在實(shí)驗(yàn)桌面上進(jìn)行，謹(jǐn)防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。

　　藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測(cè)量貯存液在440nm波長(zhǎng)處的光吸收確定放線菌素D的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。

　　0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液

　　【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調(diào)至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于-70℃

　　10mol/L乙酸酰溶液

　　【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。

　　10%過硫酸銨溶液

　　【配制方法】把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中，該溶液可在4℃保存數(shù)周。

　　BCIP溶液

　　【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃

　　2×BES緩沖鹽溶液

　　【配制方法】用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室溫下用HCl調(diào)節(jié)　該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成小份，保存于-20℃。

　　1mol/L CaCl2溶液

　　【配制方法】在200ml蒸餾水中溶解54g CaCl2?6H2O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成10ml小份貯存于-20℃。

　　【注意】制備感受態(tài)細(xì)胞時(shí)，取出一小份解凍并用蒸餾水稀釋至100ml，用Nalgene濾器(0.45μm孔徑)過濾除菌，然后驟冷至0℃。

　　2.5mol/L CaCl2溶液

　　【配制方法】在20ml蒸餾水中溶解13.5g CaCl2?6H2O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。

　　1mol/L二硫蘇糖醇(DTT)溶液

　　【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。

　　【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進(jìn)行高壓處理。

　　脫氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

　　【配制方法】把每一種dNTP溶解于水至濃度各為100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris堿分別調(diào)節(jié)　每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH試紙檢測(cè))，把中和后的每種dNTP溶液各取一份作適當(dāng)稀釋，在給出的波長(zhǎng)下讀取光密度計(jì)算出每種dNTP的實(shí)際濃度，然后用水稀釋成終濃度為50mmol/L的dNTP，分裝成小份貯存于-70℃。

　　0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?2H2O)，在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)　溶液的pH值至8.0(約需20g NaOH顆粒)然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用。

　　【注意】EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0，才能*溶解。

　　溴化乙錠(10mg/ml溶液)

　　【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數(shù)小時(shí)以確保其*溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中，保存于室溫。

　　【注意】小心：溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑并有中度毒性，使用含有這種染料的溶液時(shí)務(wù)必戴上手套，稱量染料時(shí)要戴面罩。

　　2×HEPES緩沖鹽溶液

　　【配制方法】用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH調(diào)節(jié)　pH值至7.05，再用蒸餾水定容至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成5ml小份，貯存于-20℃。

　　IPTG溶液

　　【配制方法】IPTG為異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量為238.3)，在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。

　　1mol/L乙酸鎂溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸鎂，用水定容至1L過濾除菌。

　　1mol/L MgCl2溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O，用水定容至1L，分裝成小份并高壓滅菌備用。

　　【注意】MgCl2極易潮解，應(yīng)選購小瓶(如100g)試劑，啟用新瓶后勿長(zhǎng)期存放。

　　β-巰基乙醇(BME)溶液

　　【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，應(yīng)裝在棕色瓶中保存于4℃。

　　【注意】BME或含有BME的溶液不能高壓處理。

　　NBT溶液

　　【配制方法】把0.5g氯化氮藍(lán)四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。

　　酚/lv仿溶液

　　【配制方法】把酚和lv仿等體積混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提幾次以平衡這一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆蓋等體積的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液層，保存于4℃。

　　【注意】酚腐蝕性很強(qiáng)，并可引起嚴(yán)重灼傷，操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡，穿防護(hù)服。所有操作均應(yīng)在化學(xué)通風(fēng)櫥中進(jìn)行。與酚接觸過的部位皮膚應(yīng)用大量的水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。

　　10mmol/L PMSF溶液

　　【配制方法】用異丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L)，分裝成小份貯存于-20℃。如有必要可配成濃度高達(dá)17.4mg/ml的貯存液(100mmol/L)。

　　【注意】PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF，應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí)，20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min，這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)　為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后，可安全地予以丟棄。

　　磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液

　　【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調(diào)節(jié)　溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min。保存于室溫。

　　1mol/L乙酸鉀(pH7.5)溶液

　　【配制方法】將9.82g乙酸鉀溶解于90ml純水中，用2mol/L乙酸調(diào)節(jié)　pH值至7.5后加入純水定容到1L，保存于-20℃。

　　乙酸鉀溶液(用于堿裂解)

　　【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸鉀溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成鉀濃度為3mol/L而乙酸根濃度為5mol/L的溶液。

　　3mol/L乙酸鈉(pH5.2和pH7.0)溶液

　　【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸鈉，用冰乙酸調(diào)節(jié)　pH值至5.2或用稀乙酸調(diào)節(jié)　pH值至7.0，加水定容到1L，分裝后高壓滅菌。

　　5mol/L NaCl溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。

　　10%十二烷基硫酸鈉(SDS)溶液

　　【配制方法】在900ml水中溶解100g電泳級(jí)SDS，加熱至68℃助溶，加入幾滴濃鹽酸調(diào)節(jié)　溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分裝備用。

　　【注意】SDS的微細(xì)晶粒易擴(kuò)散，因此稱量時(shí)要戴面罩，稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區(qū)和天平上的SDS，10%SDS溶液無須滅菌。

　　20×SSC溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g檸檬酸鈉，加入數(shù)滴10mol/l NaOH溶液調(diào)節(jié)　pH值至7.0，加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。

　　20×SSPE溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液調(diào)節(jié)　pH值至7.4(約需6.5ml 10ml/L NaOH)，加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。

　　100%三lv乙酸溶液

　　【配制方法】在裝有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

　　1mol/L Tris溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris堿，加入濃HCl調(diào)節(jié)　pH值至所需值。應(yīng)使溶液冷至室溫后方可后調(diào)定pH值，加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。

　　【注意】如1mol/L溶液呈現(xiàn)黃色，應(yīng)予丟棄并置備質(zhì)量更好的Tris。

　　盡管多種類型的電極均不能準(zhǔn)確測(cè)量Tris溶液的pH值，但仍可向大多數(shù)廠商購得合適的電極。Tris溶液的pH值因溫度而異，溫度每升高1℃，pH值大約降低0.03個(gè)單位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃時(shí)的pH值分別為9.5、8.9和8.6。

　　Tris緩沖鹽溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

　　【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris堿，加入0.015g酚并用HCl調(diào)至pH值至7.4，用蒸餾水定容至1L，分裝后在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min，于室溫保存。

　　配制：

　　乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.1mol/L)

　　稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽40g，加熱溶于1000ml水中，冷卻，搖勻。

　　乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.05mol/L)

　　稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽20g，加熱溶于1000ml水中，冷卻，搖勻。

　　乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.02mol/L)

　　稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽8g，加熱溶于1000ml水中，冷卻，搖勻。標(biāo)定：

　　標(biāo)定：

　　0.1mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液，取于約800℃灼燒至恒重的基準(zhǔn)氧化鋅0.25g±0.0001g，用少量水濕潤(rùn)，加2ml稀鹽酸20%使其溶解，加水100ml，用10%氨水調(diào)至PH=7～8，加10ml氨—氯化銨(pH=10)及鉻黑T指示劑，用配制好的乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色變?yōu)榧兯{(lán)色。同時(shí)做空白。

　　C(EDTA)——乙二胺四乙酸二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液量濃度 mol/L

　　V1——乙二胺四乙酸二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液用量 ml

　　V2——乙二胺四乙酸二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液用量 ml

　　0.08138——與1.00ml乙二胺四乙酸二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液1.000mol/L相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜难趸\的質(zhì)量

　　附：其他常用溶液的配制

　　1.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?2H2O)，在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)　溶液的pH值至8.0(約需20g NaOH顆粒)然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用。

　　【注意】EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0，才能*溶解。

　　0. 1mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?2H2O)，在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用2當(dāng)量NaOH調(diào)節(jié)　溶液的pH值至8.0然后定容至1L。

　　使用時(shí)稀釋一百倍變成1mMol/l EDTA工作液。PH值調(diào)至8

　　2.磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液

　　【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調(diào)節(jié)　溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min。保存于室溫。

　　3.Tris緩沖鹽溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

　　【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris堿，加入0.015g酚并用HCl調(diào)至pH值至7.4，用蒸餾水定容至1L，分裝后在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min，于室溫保存。

　　Tris緩沖鹽溶液(TBS)(50mmol/l Tris PH7.6)

　　Tris緩沖鹽溶液(TBS)(50mmol/l Tris)

　　【配制方法】稱取Tris(三羥甲基氨基甲烷)6.057g，加少許雙蒸水溶解后加1HCL42ml,Nacl 8.5g,后加雙蒸水至1000ml,用1N HCL或NAOH調(diào)至7.6,充分搖勻,4℃保存。