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微生物無菌檢測(cè)的作用
閱讀:803 發(fā)布時(shí)間:2022-7-12微生物無菌檢測(cè)用于檢查在測(cè)試條件下測(cè)試產(chǎn)品中是否存在特定微生物。用該方法檢查非無菌制劑及其原輔材料是否符合相應(yīng)的微生物*時(shí),應(yīng)按照以下規(guī)定進(jìn)行檢查,包括樣品取樣量和結(jié)果判斷。該檢查方法可以使用其他微生物檢查方法,包括自動(dòng)檢查方法,但必須證明該替代方法等效于藥典規(guī)定的檢查方法。
在微生物無菌檢測(cè)中,如果測(cè)試產(chǎn)品具有抗菌活性,應(yīng)盡可能將其去除或中和。檢查測(cè)試產(chǎn)品時(shí),如果使用中和劑或滅活劑,應(yīng)確認(rèn)其對(duì)微生物的有效性和無毒性。如果在制備測(cè)試溶液時(shí)使用表面活性劑,則應(yīng)確認(rèn)它對(duì)微生物無毒且與所用的中和劑或滅活劑兼容。應(yīng)檢查用于測(cè)試物品的對(duì)照細(xì)菌測(cè)試的培養(yǎng)基的適用性。應(yīng)測(cè)試測(cè)試產(chǎn)品的對(duì)照細(xì)菌檢查方法的方法適用性,以確認(rèn)所使用的方法適用于產(chǎn)品的對(duì)照細(xì)菌檢查。如果檢查程序或產(chǎn)品的更改可能影響檢查結(jié)果,則對(duì)照細(xì)菌的檢查方法應(yīng)重新進(jìn)行適用性試驗(yàn)。
1、菌株和細(xì)菌液體的制備
用于菌株測(cè)試的菌株的傳代次數(shù)不得超過5代(從菌株收集中心獲得的干菌株為第0代),并且適當(dāng)應(yīng)對(duì)菌株進(jìn)行保存以確保被測(cè)菌株的生物學(xué)特性。
細(xì)菌溶液的制備將金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌,大腸桿菌和沙門氏菌分別接種于胰蛋白酶大豆蛋白liquid液體培養(yǎng)基或胰蛋白酶大豆蛋白ept瓊脂培養(yǎng)基上,于30?35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。將白念珠菌接種在Sabouraud的葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或Sabouraud的葡萄糖液體培養(yǎng)基上,于20?25°C培養(yǎng)2至3天。接種產(chǎn)孢梭狀芽胞桿菌以富集梭狀芽孢桿菌。將培養(yǎng)基在30-35°C的厭氧條件下培養(yǎng)24-48小時(shí),或在30-35°C的巰基乙酸鹽液體培養(yǎng)基中接種18-24小時(shí)。將上述培養(yǎng)物用pH7.0無菌氯化鈉-緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成合適濃度的細(xì)菌懸浮液。
如果準(zhǔn)備后將細(xì)菌溶液保持在室溫下,應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用;如果儲(chǔ)存在2-8°C,則可以在24小時(shí)內(nèi)使用。產(chǎn)孢梭狀芽孢桿菌懸浮液可以代替新鮮的細(xì)菌懸浮液,穩(wěn)定的孢子懸浮液可以在2?8℃下保存,并在驗(yàn)證的保存期內(nèi)使用。
2、陰性對(duì)照
為了確認(rèn)微生物無菌檢測(cè)的條件是否符合要求,應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn),并且陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如果陰性對(duì)照有細(xì)菌生長,則應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。
3、培養(yǎng)基的適用性檢查
應(yīng)檢查對(duì)照細(xì)菌的終培養(yǎng)基,脫水培養(yǎng)基或根據(jù)處方制備的培養(yǎng)基的適用性。對(duì)照細(xì)菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促進(jìn)生長能力,抑制能力和指示特性的檢查。