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細(xì)胞培養(yǎng)板如何選考慮哪些因素
閱讀:808 發(fā)布時間:2022-7-14市場上的細(xì)胞培養(yǎng)板有不少,如何選擇合適的呢?建議從以下方面考慮:
1. 孔的數(shù)量
大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過,許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。*手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板,就更加需要機(jī)器人,而1536孔板更是需要。當(dāng)然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
2. 孔的形狀
孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。對于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)(如HeLa或MDCK細(xì)胞),特別是需要對培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測定,通常選平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細(xì)胞,弧形底(C-bottom)也不錯。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng)(如球體細(xì)胞培養(yǎng)),因為圓的表面讓細(xì)胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實驗,但在細(xì)胞沉淀時可能有用。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時,底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時,應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串?dāng)_。
4. 表面處理
選擇哪種細(xì)胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。對于懸浮或球體細(xì)胞培養(yǎng),建議使用有疏水凝膠處理的微孔板,可抑制細(xì)胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細(xì)胞(如HeLa),標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細(xì)胞(如原代細(xì)胞),或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用,建議使用不需要冷藏的微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化后,當(dāng)然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指微孔板,還包括與細(xì)胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細(xì)胞污染或死亡。