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          技術文章

          默克色譜柱的使用方法

          閱讀:1618          發(fā)布時間:2022-7-26

            默克色譜柱沒有特殊說明,它是評估報告中顯示的流動相,使用前,請務必注意液相色譜柱的存儲溶液是否與要分析的樣品的流動相混溶。在反相色譜中,如果使用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫液,則應使用約10%的低濃度有機相洗脫液進行過渡,否則緩沖液中的鹽將處于高濃度有機相。容易沉淀和阻塞色譜柱。如果要選擇合適的列,則需要了解它的分類和內(nèi)在屬性,那么默克色譜柱的使用方法是什么呢?

          默克色譜柱

            1、獲得默克色譜柱后,請先閱讀說明以了解該柱的具體性能:溫度耐受性,pH耐受性等。以及色譜柱的洗滌和儲存條件。色譜柱校準測試確認色譜柱本身沒有問題后,即可正常使用。
            2、對樣品進行充分的預處理,以確保樣品的清潔度;使用保護柱或在線過濾器,并根據(jù)實際情況更換保護柱或過濾器。
            3、避免突然的壓力和溫度變化以及任何機械振動。
            4、溶劑的組成應逐漸改變,尤其是在反相色譜中在流動相中使用緩沖鹽時,應避免鹽析。
            5、選擇合適的流動相(尤其是PH),以避免損壞固定相,在低pH下共價鍵斷裂以及鍵和相水解;高pH下的硅膠溶解。
            6、在使用默克色譜柱的過程中,如果壓力升高或發(fā)生污染,請選擇適當?shù)臎_洗或反沖洗條件。
            適用于氨基色譜柱和氰基色譜柱
            常規(guī)清潔:乙腈:水=60:40,以沖洗色譜柱。不建議在清潔過程中水相比率超過40%。水相的過量使用將容易導致鍵和相的水解。
            色譜柱再生:長時間使用色譜柱并且降低了色譜柱校準量后,可以再生色譜柱。乙腈:水(水中0.05%氨水)=60:40的條件,并沖洗30倍柱體積。


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            色譜柱可分為填充柱和開管柱,由多金屬玻璃制成或制成。有直管形、盤管形、U形管等形狀。填充柱通常用于液相色譜,色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。色譜是分離分析的手段,分離是核心。因此,負責分離的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱的要求是柱效高、選擇性好、分析速度快。各種市售的HPLC顆粒填料,如多孔硅膠和基于硅膠的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,粒徑為3、5、7、10μM,柱效理論值可達50000~160000/m。一般分析只要求5000塔板的柱效;同源分析,只要500;對于較難分離的物料對,最多可使用20000根柱子,因此10~30cm左右的柱長可以滿足復雜混合物分析的需要。


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