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          技術(shù)文章

          默克色譜柱的使用方法

          閱讀:1521          發(fā)布時間:2022-7-26

            默克色譜柱沒有特殊說明,它是評估報告中顯示的流動相,使用前,請務(wù)必注意液相色譜柱的存儲溶液是否與要分析的樣品的流動相混溶。在反相色譜中,如果使用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫液,則應(yīng)使用約10%的低濃度有機相洗脫液進行過渡,否則緩沖液中的鹽將處于高濃度有機相。容易沉淀和阻塞色譜柱。如果要選擇合適的列,則需要了解它的分類和內(nèi)在屬性,那么默克色譜柱的使用方法是什么呢?

          默克色譜柱

            1、獲得默克色譜柱后,請先閱讀說明以了解該柱的具體性能:溫度耐受性,pH耐受性等。以及色譜柱的洗滌和儲存條件。色譜柱校準測試確認色譜柱本身沒有問題后,即可正常使用。
            2、對樣品進行充分的預(yù)處理,以確保樣品的清潔度;使用保護柱或在線過濾器,并根據(jù)實際情況更換保護柱或過濾器。
            3、避免突然的壓力和溫度變化以及任何機械振動。
            4、溶劑的組成應(yīng)逐漸改變,尤其是在反相色譜中在流動相中使用緩沖鹽時,應(yīng)避免鹽析。
            5、選擇合適的流動相(尤其是PH),以避免損壞固定相,在低pH下共價鍵斷裂以及鍵和相水解;高pH下的硅膠溶解。
            6、在使用默克色譜柱的過程中,如果壓力升高或發(fā)生污染,請選擇適當(dāng)?shù)臎_洗或反沖洗條件。
            適用于氨基色譜柱和氰基色譜柱
            常規(guī)清潔:乙腈:水=60:40,以沖洗色譜柱。不建議在清潔過程中水相比率超過40%。水相的過量使用將容易導(dǎo)致鍵和相的水解。
            色譜柱再生:長時間使用色譜柱并且降低了色譜柱校準量后,可以再生色譜柱。乙腈:水(水中0.05%氨水)=60:40的條件,并沖洗30倍柱體積。


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            色譜柱可分為填充柱和開管柱,由多金屬玻璃制成或制成。有直管形、盤管形、U形管等形狀。填充柱通常用于液相色譜,色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。色譜是分離分析的手段,分離是核心。因此,負責(zé)分離的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱的要求是柱效高、選擇性好、分析速度快。各種市售的HPLC顆粒填料,如多孔硅膠和基于硅膠的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,粒徑為3、5、7、10μM,柱效理論值可達50000~160000/m。一般分析只要求5000塔板的柱效;同源分析,只要500;對于較難分離的物料對,最多可使用20000根柱子,因此10~30cm左右的柱長可以滿足復(fù)雜混合物分析的需要。


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