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培養(yǎng)基移種方法是什么
閱讀:824 發(fā)布時(shí)間:2022-8-12一、斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)
(1)材料
瓊脂斜面培養(yǎng)基
經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。
(2)方法
?、僭诃傊泵媾囵B(yǎng)基試管上部標(biāo)明移種的菌名(或編號(hào))、接種日期、接種者的組別及代號(hào)。
②左手持長(zhǎng)有細(xì)菌的平板底,右手持接種環(huán)。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后,沾取平板劃線上發(fā)育良好的孤立菌落。把平板放回原處,立即用此手取斜面培養(yǎng)基斜持,用右手小指與手掌夾持棉塞,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后撥出棉塞,管口通過(guò)火焰滅菌。
③將已沾菌的接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基的管底部的凝固水,沿斜面培養(yǎng)基的表面從底向上劃一直線,然后再?gòu)牡撞肯蛏蟿澾B續(xù)曲折線;也可不劃直線只劃曲折線。取出接種環(huán),管口通過(guò)火焰滅菌,塞好棉塞,放試管架上,接種環(huán)火焰滅菌后放下。
向斜面培養(yǎng)基上移種的細(xì)菌如果是生長(zhǎng)在斜面培養(yǎng)基上的,或是生長(zhǎng)在液體培養(yǎng)基中的,則用左手同時(shí)斜持菌種管和斜面培養(yǎng)基兩個(gè)管,右手無(wú)名指、小指手掌同時(shí)拔起夾持二個(gè)棉塞。管口及接種環(huán)先經(jīng)火焰滅菌后,從菌種管取菌立即移種到斜面上,塞好棉塞,接種環(huán)火焰滅菌后放下。然后將斜面培養(yǎng)基放37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。結(jié)果斜面表面形成菌苔。
二、液體培養(yǎng)基移種技術(shù)
用于純種細(xì)菌的增菌及觀察細(xì)菌在液體環(huán)境中的生長(zhǎng)特征(混濁生長(zhǎng),表面生長(zhǎng)或沉淀生長(zhǎng))
(1)材料
肉湯培養(yǎng)基
斜面培養(yǎng)物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)
(2)方法
①取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌、冷卻。
?、谝浴半p管移植法"左手持細(xì)菌斜面培養(yǎng)物和肉湯培養(yǎng)基兩支試管,右手持接種環(huán),按無(wú)菌操作法取少量細(xì)菌,將沾菌的接種環(huán)在斜傾的接近液面的管壁上輕輕涂抹研勻,試管直立使沾附在管壁上的細(xì)菌沒(méi)入液體中,接種后放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。
(3)結(jié)果
①渾濁生長(zhǎng)大腸埃希菌菌液呈均勻混濁,管底有少量沉淀。
②沉淀生長(zhǎng)化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀,菌液無(wú)明顯渾濁。
③菌膜生長(zhǎng)枯草芽胞桿菌菌液表面形成膜狀物。
三、半固體培養(yǎng)基移種技術(shù)
用于保存菌種及間接檢查細(xì)菌有無(wú)動(dòng)力。
(1)材料
半固體培養(yǎng)基。
細(xì)菌斜面培養(yǎng)物。
(2)方法
?、賹⒔臃N針經(jīng)火焰滅菌冷卻后,從斜面培養(yǎng)物表面沾取細(xì)菌。
?、谟脽o(wú)菌法穿刺接種,將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央,深度達(dá)距管底0.5cm處停止,然后循原路退出。注意在刺入及拔出時(shí)要保持接種針不向穿刺線外擺動(dòng)。
?、墼嚬芸谕ㄟ^(guò)火焰滅菌,塞上棉塞。接種針經(jīng)火焰滅菌。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。
(3)結(jié)果:有動(dòng)力的細(xì)菌呈擴(kuò)散生長(zhǎng),無(wú)動(dòng)力的細(xì)菌沿穿刺線生長(zhǎng)。