關(guān)鍵詞:單抗定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介：世界*品牌單抗定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝，質(zhì)量保證,*。
單抗定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧，承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí)，我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面，我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒?yàn)流程：
單克隆抗體（單抗）應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)將免疫動(dòng)物的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，通過HAT篩選，ELISA抗體檢測，有限稀釋克隆化，選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細(xì)胞的雜交瘤細(xì)胞，并產(chǎn)生抗體，就是單克隆抗體。單抗的zui大優(yōu)勢是它的特異性、均一性、性和無限供應(yīng)性。在免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)上，包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預(yù)防和治療等方面，均顯示出巨大的生命力。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價(jià)較高的小鼠，取脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合
3. 進(jìn)行2~4次克隆化及ELISA篩選，確保雜交瘤細(xì)胞分泌抗體的穩(wěn)定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細(xì)胞的凍存，并免費(fèi)提供一年的保種服務(wù)
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞凍存：液氮凍存（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1 Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks
細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。 
所有細(xì)胞入庫之前均經(jīng)過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測和鑒定
所有細(xì)胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證
確保細(xì)胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)
高質(zhì)量ATCC產(chǎn)品對您的研究非常重要
1.細(xì)胞形態(tài)觀察。細(xì)胞膜是每天必須觀察的，看是否清晰，細(xì)胞的死亡往往是從細(xì)胞膜的破裂開始的，早期的表現(xiàn)就是細(xì)胞膜某一點(diǎn)出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
2.細(xì)胞往往會(huì)有“抱團(tuán)"現(xiàn)象，抱團(tuán)生長或死亡，個(gè)人認(rèn)為應(yīng)該勤換液或傳代，盡量避 免細(xì)胞抱團(tuán)。
3.細(xì)胞生長迅速，強(qiáng)烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng)，用小瓶養(yǎng)的話，換液不及時(shí)，很容易死 亡。細(xì)胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代，并且一般為一傳三，或一傳四。
4.培養(yǎng)液：1640培養(yǎng)液，1L一般加碳酸氫鈉2g，并加雙抗，胎牛血清濃度*為12%，zui低 不低于10%，HL60細(xì)胞對胎牛血清高度依賴。培養(yǎng)液PH應(yīng)調(diào)為7.20-7.40之間。
5.防污染。HL60細(xì)胞生長迅速，較少發(fā)生污染，但常規(guī)措施應(yīng)該做好。比如無菌操作，酒精 消毒等，培養(yǎng)瓶口建議過火，包括瓶蓋，應(yīng)過火4秒左右。
6.凍存。-20一小時(shí)，-80液氮長期保存。強(qiáng)烈建議液氮長期保存，盡量不要在-80長期 保存，死亡率很高。
7.復(fù)蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃，并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液，使培養(yǎng)液溫度與室溫一 致。1分鐘內(nèi)融化細(xì)胞(禁止搖晃凍存管)，移取至試管內(nèi)，動(dòng)作要輕，從試管管底開始慢慢上提 移液管，使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻，離心，洗2次。
收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。 (一)如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè) 瓶消毒后放到超菌 臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開血管平滑肌細(xì)胞瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS(不含鈣，鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中， 倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將 培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30 秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分 散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶， 細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6 傳代;2~3天1次。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì) 胞不適應(yīng)而造成生長不好。
凍存方法：凍存液：基礎(chǔ)培養(yǎng)基 +5%DMSO+20%FBS
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存