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        1. 上海拜力生物科技有限公司

          流式細胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)

          時間:2015-9-1閱讀:149

          關(guān)鍵詞:流式細胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)
          簡介:世界*品牌流式細胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
          流式細胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
          我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
          產(chǎn)品品牌:   
          測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>PI 染色操作步驟
          1、將單細胞懸液加入2ml圓底離心管中,離心,1500rpm , 5min,棄上清液。
          2、加入PBS 1ml離心洗滌1次,棄上清。
          3、加入2ml預(yù)冷的70%酒精,4℃固定30min,或是-20℃固定。
          4、離心,棄上清液。
          5、用1×PBS 1ml洗滌1次,離心。
          6、加入RNase A (工作濃度20ug/ml)于500ul 1×PBS中,37℃孵育30min,離心。
          7、用1×PBS 1ml洗滌1次,離心。
          8、加入PI(工作濃度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中,室溫避光孵育30min。
          9、混勻,過300目篩網(wǎng),置流式管中, 4℃冰箱保存,待測。
          GFP PI染色操作步驟
          1、將單細胞懸液加入2ml圓底離心管中,離心,1500rpm , 5min,棄上清液。
          2、加入PBS 1ml離心洗滌1次,棄上清。
          3、加入2ml預(yù)冷PFA,PFA的濃度根據(jù)細胞的特點進行調(diào)節(jié),4℃固定30min。
          以下步驟同PI 染色操作步驟的
          細胞表面直接免疫熒光染色操作步驟
          1、將單細胞懸液加入2ml圓底離心管中,離心,1500rpm,5min,棄上清液。
          2、以冷PBA 1ml,離心洗滌,棄上清液。
          3、加入用PBA稀釋的熒光素標記的抗體200ul。用微量移液器輕輕吹打混勻,4℃或置冰上孵育30min-1h。
          4、離心棄上清液。
          5、加入冷PBS1ml,離心洗滌2次,以除去未結(jié)合的多余抗體成分。
          6、向細胞中加入冷PBS 500ul,吹打混勻,置流式管中,4℃避光保存,待測。
          細胞表面間接免疫熒光染色操作步驟
          1-2、同細胞表面直接免疫熒光染色操作步驟
          3、 用PBA稀釋的*抗體200ul,對照管加入對應(yīng)于一抗的正常實驗動物IgG,輕輕吹打混勻,4℃或置冰上孵育1.5-2h。離心,棄上清。
          4、 BS1ml離心洗滌1次,以去除多余的未結(jié)合的特異性抗體。
          5、 PBA適當稀釋的熒光素標記的第二抗體200ul。吹打混勻,4℃或置冰上孵育30min,避光。
          6、 PBS 1ml離心洗滌2次。
          7、將細胞重新懸浮于500ulPBS中,混勻,置流式管中,避光,4℃冰箱保存,待測。

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