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          目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)>>培養(yǎng)基>> 31800-500RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基

          RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基
          • RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
          • 型號(hào) 31800-500
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 北京市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-08-22 15:17:23瀏覽次數(shù):5019評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
          貨號(hào) 31800 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油
          主要用途 1640培養(yǎng)基
          RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基
          中文名稱;RPMI Medium 1640
          生廠商:solarbio
          貨號(hào);31800
          規(guī)格:500ml
          保存條件: 2-8℃

          RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基

           

          RPMI Medium 1640由GIBCO干粉配制,過(guò)濾滅菌。含雙抗、HEPES。保存期長(zhǎng),緩沖能力強(qiáng)。
          細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
          索萊寶公司生產(chǎn)的培養(yǎng)基精選進(jìn)口干粉,用超純?nèi)ルx子水配制,0.1um過(guò)濾而成,含雙抗,含Hepes。

          RPMI Medium 1640(含雙抗) 培養(yǎng)基

           

           

          平時(shí)研究用的細(xì)胞,有需要冷凍保存。冷凍的過(guò)程稱為凍存,把凍上的細(xì)胞化開(kāi)的過(guò)程叫細(xì)胞復(fù)蘇。細(xì)胞復(fù)蘇是一簡(jiǎn)單的試驗(yàn)操作,但操作中有許多需要注意的事項(xiàng),在實(shí)驗(yàn)操作中注意細(xì)小問(wèn)題,才能使復(fù)蘇后的細(xì)胞狀態(tài)保持良好。

          細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:

          主要器材:一次性滴管、打火機(jī)、酒精燈、大鑷子、中鑷子、記號(hào)筆、廢液缸、封口膜、剪子。

          主要試劑: PBS、培養(yǎng)液、消化酶(胰酶)、75%酒精、雙抗。

          PBS配制:NaCL :4g   KCL:0.1g   Na2HPO4 :1.745g   KH2PO4 :0.1g

          三蒸水: 500mL,溶解后高壓滅菌。

          培養(yǎng)基配制:5mL雙抗、50mL血清,加入培養(yǎng)基中。

          細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:

          1.佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

          2.迅速放入38℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其*融化,然后在無(wú)菌下取出細(xì)胞。

          3.在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代?;驘o(wú)需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時(shí)后,充去上清,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

          細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項(xiàng):

          1.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)要注意融化凍存細(xì)胞的應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快,可不時(shí)搖動(dòng)安瓿或冷凍管,使之盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。

          2.凍存液對(duì)細(xì)胞有毒性,解凍后必須用Dhanks洗兩遍才能移入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。培養(yǎng)液中血清不能太少。

          3.從液氮拿出來(lái),以快速度丟入37度水浴,等細(xì)胞液剛剛化完取出,加培養(yǎng)液稀釋。這樣可以避免復(fù)蘇過(guò)程中細(xì)胞液中有冰晶的出現(xiàn),冰晶會(huì)破壞細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的。

          4.剛復(fù)蘇的細(xì)胞還是少折騰它好,細(xì)胞37°快速解凍后直接放入預(yù)熱的培養(yǎng)基。

          5.DMSO在4度以下對(duì)細(xì)胞無(wú)毒,4度以上有毒;復(fù)蘇必須盡快除去。要記得慢凍速溶!

          6.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。

          7.常溫下二甲基亞砜(DMSO)對(duì)細(xì)胞的毒副作用較大,因此,必須在1-2 min內(nèi)使凍存液*融化。如果復(fù)蘇溫度太低,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,所以選擇40℃復(fù)蘇。8.貼壁細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)流程是將解凍后的細(xì)胞懸液行離心,以去除冷凍保護(hù)液DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷,但是離心也會(huì)對(duì)剛復(fù)蘇的狀態(tài)欠佳的細(xì)胞產(chǎn)生損傷。也有的實(shí)驗(yàn)操作是將解凍后的細(xì)胞懸液先直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。這可能使培養(yǎng)基中少量的DMSO對(duì)細(xì)胞造成損傷。

          細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的原意有哪些:

          1.凍存細(xì)胞的時(shí)候是不是消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人注意不到的地方,要知道太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)使細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力。

          2.有可能是細(xì)胞凍存液的質(zhì)量,細(xì)胞凍存液的質(zhì)量不好也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

          3.凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。

          4.凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。

          5.凍存時(shí)溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。

          相關(guān)文獻(xiàn):

           《c-Myc induced upregulation of long non-coding RNA SNHG16 enhances progression and carcinogenesis in oral squamous cell carcinoma》 作者:Shangfeng Li, Shengkai Zhang, Jie Chen 期刊:Cancer gene therapy 影響因子:4.681 PMID:30607006
          《Suberoylanilide hydroxamic acid inhibits proliferation and promotes apoptosis of mouse myeloma Sp2/0 cells through activating p53/caspase-3 signaling》 作者:Yanliang Bai, Lei Huo, Chenyu Zhang, Mingyue Shi, Na Fang, Shaoping Ji, Kai Sun 期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINE 影響因子:1.875 PMID:
          《Gecko Active Components Regulates Endoplasmic Reticulum Stress to Induce the Apoptosis of KYSE150 Cells through PERK Pathway》 作者:Yimeng Duan, Lengxin Duan, Zeyue Huang, Bingbing Wang, Jiangang Wang 期刊:Journal of Biosciences and Life Sciences 影響因子:0.552 PMID:
          《RNA-binding protein RBM6 as a tumor suppressor gene represses the growth and progression in laryngocarcinoma》 作者:Qiwei Wang,Fang Wang,Waisheng Zhong,Hang Ling,Jixuan Wang,Jie Cui,Tao Xie,Senli Wen,Jie Chen 期刊:Gene 影響因子:2.638 PMID:30772516
          《Sphingomyelin synthase 2 promotes H2O2-induced endothelial dysfunction by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway》 作者:Panpan Zhang,Lingyue Hua,Huan Hou, Xingyue Du,Zhiqiang He, Menghan Liu, Xiaojuan Hu, Nianlong Yan 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30272329
          《Downregulation of transcription factor EB inhibits the growth and metastasis of colorectal carcinomas》 作者:Jin-Zhe Chang,Shu-Dong Chen,Hui Zheng,Hua-Ping Zhang 期刊:European Journal of Inflammation 影響因子:0.733 PMID:
          《Circular RNA hsa_circ_0002024 suppresses cell proliferation, migration, and invasion in bladder cancer by sponging miR-197-3p》 作者:Yongjun Jiang, Tingran Wei, Wei Li, Ruihua Zhang, and Maogang Chen 期刊:American journal of Translational Research 影響因子:3.266 PMID:30972190
          《Effect of microRNA‐128 on cisplatin resistance of glioma SHG‐44 cells by targeting JAG1》 作者:Dong‐Ye Yi, Qing Su, Fang‐Cheng Zhang, Peng Fu, Qing Zhang, Yong‐Cun Cen, Hong‐Yang Zhao,Wei Xiang 期刊:Journal of Cellular Biochemistry 影響因子:3.448 PMID:29091297
          《miR‐377‐5p inhibits lung cancer cell proliferation, invasion, and cell cycle progression by targeting AKT1 signaling》 作者:Han Wu,Haiyan Liu,Wenjie Liu,Yongli Shi,Dawei Bao 期刊:Journal of Cellular Biochemistry 影響因子:3.448 PMID:30485528
          《Activity of coumarin against Candida albicans biofilms》 作者:K.Xu  J.L.Wang  M.P.Chu  C.Jia 期刊:Journal de Mycologie Medicale 影響因子:1.479 PMID:30606640
          《Gallic acid has anticancer activity and enhances the anticancer effects of cisplatin in non?small cell lung cancer A549 cells via the JAK/STAT3 signaling pathway》 作者:Tingxiu Zhang, Lijie Ma, Pengfei Wu, Wei Li, Ting Li, Rui Gu, Xiaoping Dan, Zhiwei Li, Xianming Fan, Zhenliang Xiao 期刊:Oncology Reports 影響因子:3.041 PMID:30747218
          《c-Myc, RMRP, and miR-34a-5p form a positive-feedback loop to regulate cell proliferation and apoptosis in multiple myeloma》 作者:Xichun Xiao,Yueli Gu,Genjie Wang,Shuxia Chen 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30389523
          《Downregulation of lncRNA NEAT1_2 radiosensitizes hepatocellular carcinoma cells through regulation of miR‐101‐3p/WEE1 axis》 作者:Xin Chen, Nuobei Zhang 期刊:Cell Biology International 影響因子:2.127 PMID:30488993
          《Knockdown of USP28 enhances the radiosensitivity of esophageal cancer cells via the c‐Myc/hypoxia‐inducible factor‐1 alpha pathway》 作者:Zhang Weili, Liu Zhikun,Wang Jianmin, Tian Qingbao 期刊:Journal of Cellular Biochemistry 影響因子:3.448 PMID:30206969
          《Circulating exosomes activate dendritic cells and induce unbalanced CD4+ T cell differentiation in Hashimoto thyroiditis》 作者:Xuejiao Cui, Yongping Liu, Shuo Wang, Na Zhao, Jing Qin, Yushu Li,Chenling Fan, Zhongyan Shan, Weiping Teng 期刊:The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 影響因子:5.605 PMID:31199456
          《A Host Factor GPNMB Restricts Porcine Circovirus Type 2 (PCV2) Replication and Interacts With PCV2 ORF5 Protein》 作者:Kangkang Guo, Lei Xu, Mengmeng Wu, Yufeng Hou, Yanfen Jiang, Jiangman Lv, Panpan Xu, Zhixin Fan, Ruiqi Zhang, Fushan Xing and Yanming Zhang 期刊:Frontiers in Microbiology 影響因子:4.019 PMID:30671053
          《Effects of a novel photoactivated photosensitizer on MDR1 over-expressing human breast cancer cells》 作者:Chen Jing-Jing,Liu Shu-Ping,Zhao Jun,Wang Si-Cheng,Liu Tian-Jun,Li Xiang 期刊:Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology 影響因子:2.814 PMID:28478351
          《Therapeutic effects of Hedyotis diffusa Willd in a COPD mouse model challenged with LPS and smoke》 作者:Renping Liu,Peihong Wang,Caiqing Wu,Juan Chen,Chengxin Li,Yongtao Xie,Qi Wang,Jianming Liu,Huan He,Jing Zhu 期刊:Experimental
             and Therapeutic Medicine 影響因子:1.41 PMID:29545859"
          《Trophoblast glycoprotein promotes pancreatic ductal adenocarcinoma cell metastasis through Wnt/planar cell polarity signaling》 作者:Ping He, Shuheng Jiang, Mingze Ma ,Yang Wang, Rongkun Li, Fang Fang, Guangang Tian ,Zhigang Zhang 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.922 PMID:25738465
          《LPS?induced proinflammatory cytokine expression in human airway epithelial cells and macrophages via NF?κB, STAT3 or AP?1 activation》 作者:Xuefang Liu, Sugai Yin, Yulong Chen, Yaosong Wu ,Wanchun Zheng, Haoran Dong, Yan Bai, Yanqin Qin, Jiansheng Li, Suxiang Feng, Peng Zhao 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.922 PMID:29393460
          《TINAGL1 promotes hepatocellular carcinogenesis through the activation of TGF-β signaling-medicated VEGF expression》 作者:L Sun, Z Dong, H Gu, Z Guo, Z Yu 期刊:Cancer Management and Research 影響因子:3.702 PMID:30697069
          《Selective anticancer activity of the novel steroidal dihydropyridine spirooxindoles against human esophageal EC109 cells》 作者:Xiaoli Shi,Tiantian Qin,Weihua Liu,Xueyan Zhang,Leilei Li,Junfeng Huo,Kairui Zhou,Dongxiao Yang,Yanling Zhang,Cong Wang 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:2.068 PMID:
          《Evaluation of the cytotoxicity of cigarette smoke total particulate matter using three in vitro assays and two types of cells》 作者:Xiang Li, Bin Peng, Cong Nie, Pingping Shang & Huimin Liu 期刊:Journal Toxicology Mechanisms and Methods 影響因子:1.367 PMID:23193988
          《Ethylenecarbodiimide-fixed splenocytes carrying whole islet antigens decrease the incidence of diabetes in NOD mice via down-regulation of effector memory T cells and autoantibodies》 作者:Jiaqi Zou, Xinpu Gao, Tengli Liu, Rui Liang, Yaojuan Liu, Guanqiao Wang, Le Wang, Na Liu, Peng Sun, Zhiping Wang, Shusen Wang, Zhongyang Shen 期刊:Endocrine Journal 影響因子:1.911 PMID:29998909
          《SIRT1 expression regulates the transformation of resistant esophageal cancer cells via the epithelial-mesenchymal transition》 作者:Tiantian Qin,Weihua Liu,Junfeng Huo,Leilei Li,Xueyan Zhang,Xiaoli Shi,Jinlei Zhou,Cong Wang 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:2.068 PMID:29656187
          《Targeting the Bcl-2 family and P-glycoprotein reverses paclitaxel resistance in human esophageal carcinoma cell line》 作者:Xiaoli Shi,Yinhui Dou,Kairui Zhou,Jinling Huo,Tengjiao Yang,Tiantian Qin,Weihua Liu,Saiqi Wang,Dongxiao Yang,Liming Chang,Cong Wang 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.457 PMID:28441715
          《High incidence of coding gene mutations in mitochondrial DNA in esophageal cancer》 作者:Zong?Wen Liu, Zhen?Jiang Guo, A?Lan Chu, Yan Zhang, Bing Liang, Xing Guo, Ting Chai, Rui Song, Ge Hou, Jin?Jin Yuan 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.922 PMID:28990096
          《在前DC到成熟DC的分化過(guò)程中表型和分泌功能的動(dòng)態(tài)變化》 作者:王晶(汪晶)立博釗(趙利波)升昌(昌盛)Chang-sheng Ming (明長(zhǎng)生)楊軍(楊軍) 期刊:華中科技大學(xué)學(xué)報(bào) 影響因子:0.38 PMID:
          《Simultaneous determination of saikosaponins in Bupleurum Radix from different locations by high performance liquid chromatography- charged aerosol detection (HPLC-CAD) method and its immunomodulation effects on mouse splenocytes》 作者:Lina Wang, Bin Chen, Wei Wang, Nan Xu and Tianzhu Jia* 期刊:academic Journals 影響因子: PMID:
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          《Prognostic implications and oncogenic roles of MYBL2 protein expression in esophageal squamous-cell carcinoma》 作者:Hui Qin,Yunyun Li, Hongyan Zhang,Feng Wang, Hongliu He, Xue Bai,and Shanshan Li 期刊:OncoTargets and Therapy 影響因子:3.046 PMID:30881043
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          《In vitro and in vivo studies of antiosteosarcoma activities of formononetin》 作者:Wei Hu , Xianpei Wu,  Jiandong Tang , Niansu Xiao , Guoping Zhao,  Li Zhang , Luanhai Ou 期刊:Journal of Cellular Physiology 影響因子:4.522 PMID:30790283
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