目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)>>胰蛋白酶消化液>> T1320T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
參考價(jià) | 面議 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2024-08-22 18:14:47瀏覽次數(shù):5379評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500ml |
---|---|---|---|
貨號(hào) | T1320 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 液體,2.5g 豬胰蛋白酶和0.2g EDTA溶于1升PBS。不含鈣和鎂,含酚紅 |
T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液)和傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶,EDTA,其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解,使組織或細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。
胰蛋白酶(Trypsin)簡(jiǎn)稱(chēng)胰酶,是由動(dòng)物豬胰臟中提取的一種蛋白酶制劑。胰蛋白酶作用于與賴(lài)氨酸或精氨酸相連接的肽健,除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白,影響細(xì)胞骨架,打開(kāi)細(xì)胞-細(xì)胞,細(xì)胞-基質(zhì)之間的連接從而使細(xì)胞從培養(yǎng)板上脫落下來(lái)并使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。胰蛋白酶液濃度越高,作用越強(qiáng),但超過(guò)一定限度會(huì)損傷細(xì)胞。細(xì)胞消化用胰蛋白酶常用的工作濃度為0.25%,pH為7.2-7.4之間,用濾器過(guò)濾除菌。EDTA用來(lái)螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。注意EDTA不能被血清中和,使用后培養(yǎng)瓶要*清洗,否則再培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞容易脫壁。
胰蛋白酶液消化時(shí)間:2-10分鐘。用含血清培養(yǎng)液終止其對(duì)細(xì)胞的消化作用。
使用說(shuō)明:1、貼壁細(xì)胞的消化:貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)成致密單層后,繼續(xù)生長(zhǎng)的空間不足,培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成份也消耗較多,同時(shí)代謝廢物也有較多堆積,需要分瓶培養(yǎng),擴(kuò)增、傳代。對(duì)于懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞和貼壁不太緊的細(xì)胞如SP2/0,293等,可直接吹散后分瓶;而對(duì)于貼壁較緊的細(xì)胞如Hela,HepG2,CHO等,則需要以細(xì)胞消化液消化后,才能脫落和分散,擴(kuò)瓶。一般操作過(guò)程為(以下操作均必須嚴(yán)格按無(wú)菌操作的要求進(jìn)行):
(1)將長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶中原來(lái)的培養(yǎng)液棄去;
(2)加入0.25%胰酶溶液,視細(xì)胞瓶的大小加入體積為0.5ml或更多(依培養(yǎng)器皿的大小而定),以使充分浸潤(rùn);
(3)一般消化時(shí)間約為13分鐘,肉眼觀(guān)察瓶底由半透明(細(xì)胞單層連接成片)轉(zhuǎn)為點(diǎn)狀透明(出現(xiàn)細(xì)小空隙)時(shí),棄去細(xì)胞消化液,并加入適量的*培養(yǎng)液終止消化,吹打分散;
(4)視實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆秩攵嗥坷^續(xù)培養(yǎng),一般比例為一傳二到一傳四的。
2、組織的消化:不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):1.由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定佳消化時(shí)間;消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況;
2、分裝胰蛋白酶-EDTA消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染;
3、胰蛋白酶-EDTA消化液建議-20℃保存,切忌反復(fù)凍融,
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套進(jìn)行試驗(yàn)操作。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
相關(guān)產(chǎn)品:
T1300 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)不含酚紅 100ml 90.00
T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚紅 100ml 90.00
T1350 胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚紅 100ml 90.00
P1400 青鏈霉素混合液(雙抗)(100×) 100ml 90.00
P8370 細(xì)胞分離液() 100ml 600.00
P8610 人外周血淋巴細(xì)胞分離液 200ml 150.00
P8670 人外周血白細(xì)胞分離液 200ml 480.00
(各種淋巴細(xì)胞分離液均有貨,可直接咨詢(xún))
F0020 無(wú)菌去離子水(For Cell Culture ) 100ml/500ml 40/70
H1090 1M Hepes溶液(Free Acid,無(wú)菌) 100ml/500ml240/900
T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)