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          目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細胞培養(yǎng)相關>>胰蛋白酶消化液>> T1320T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液

          T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
          • T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
          • 型號 T1320
          • 廠商性質 生產商
          • 所在地 北京市
          屬性

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          更新時間:2024-08-22 18:14:47瀏覽次數(shù):5320評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
          貨號 T1320 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),石油
          主要用途 液體,2.5g 豬胰蛋白酶和0.2g EDTA溶于1升PBS。不含鈣和鎂,含酚紅
          T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
          在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液

          T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液

           

          在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)和傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液胰蛋白酶EDTA,其功能主要是使細胞間的蛋白質水解,使組織或細胞分散成單個細胞,制成細胞懸液用于進一步的實驗。
          胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是由動物豬胰臟中提取的一種蛋白酶制劑。胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健,除去細胞間粘蛋白及糖蛋白,影響細胞骨架,打開細胞-細胞,細胞-基質之間的連接從而使細胞從培養(yǎng)板上脫落下來并使細胞分散成單個細胞。胰蛋白酶液濃度越高,作用越強,但超過一定限度會損傷細胞。細胞消化用胰蛋白酶常用的工作濃度為0.25%,pH為7.2-7.4之間,用濾器過濾除菌。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。注意EDTA不能被血清中和,使用后培養(yǎng)瓶要*清洗,否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
          胰蛋白酶液消化時間:2-10分鐘。用含血清培養(yǎng)液終止其對細胞的消化作用。
          使用說明:1、貼壁細胞的消化:貼壁細胞在培養(yǎng)瓶中長成致密單層后,繼續(xù)生長的空間不足,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成份也消耗較多,同時代謝廢物也有較多堆積,需要分瓶培養(yǎng),擴增、傳代。對于懸浮生長細胞和貼壁不太緊的細胞如SP2/0,293等,可直接吹散后分瓶;而對于貼壁較緊的細胞如Hela,HepG2,CHO等,則需要以細胞消化液消化后,才能脫落和分散,擴瓶。一般操作過程為(以下操作均必須嚴格按無菌操作的要求進行):
             (1)將長成致密單層細胞的細胞瓶中原來的培養(yǎng)液棄去; 
             (2)加入0.25%胰酶溶液,視細胞瓶的大小加入體積為0.5ml或更多(依培養(yǎng)器皿的大小而定),以使充分浸潤; 
             (3)一般消化時間約為13分鐘,肉眼觀察瓶底由半透明(細胞單層連接成片)轉為點狀透明(出現(xiàn)細小空隙)時,棄去細胞消化液,并加入適量的*培養(yǎng)液終止消化,吹打分散;  
             (4)視實驗目的分入多瓶繼續(xù)培養(yǎng),一般比例為一傳二到一傳四的。 
          2、組織的消化:不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

          注意事項:1.由于組織或細胞性質不同,實驗人員應依據具體情況,確定佳消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況;
          2、分裝胰蛋白酶-EDTA消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染;
          3、胰蛋白酶-EDTA消化液建議-20℃保存,切忌反復凍融,
          4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套進行試驗操作。

          相關文獻:

          《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699

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