目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標檢測試劑盒>>還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒>> BC1170還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號 | BC1170 | 主要用途 | GSH 是細胞內最主要的抗氧化巰基物質,在抗氧化、蛋白質巰基保護和氨基酸跨膜運輸 |
還原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)含量測定試劑盒說明書
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?產(chǎn)品簡介:
GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)。
DTNB與GSH反應生成復合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度變化與GSH含量成正比。
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水
產(chǎn)品內容:
試劑一×1支,充分溶解于50ml雙蒸水,4℃保存
試劑二×1支,充分溶解于50ml雙蒸水中,4℃保存
試劑三×1支,充分溶解于10ml雙蒸水中,4℃避光保存
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?操作步驟:
一、樣品前處理 :
取組織約0.1g,加1ml試劑二,冰上充分研磨,8000rpm 4℃離心10min,取上清。(如上清不清澈,再離心3min)
GSH測定操作:
測定前將試劑一于25℃水浴20min
按每100mg組織加入1000µL生理鹽水的比例進行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
對于非哺乳動物組織:按每100mg組織加入1000µL提取液的比例進行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
(2)血清(漿)樣品:直接檢測。
二、測定操作表:
| 測定管 | 空白管 |
樣本 | 0.1ml | / |
試劑一 | 0.7ml | 0.7ml |
蒸餾水 | / | 0.1ml |
試劑三 | 0.2ml | 0.2ml |
迅速混勻,于412nm測吸光值,并記錄第60s的OD值
GSH含量計算:
GSH標準曲線公式:y=0.0015x+0.0818(x為GSH濃度,y為吸光值)
液體中GSH(μmol/L)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)
組織中GSH計算:
①GSH(μmol/mg prot)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品蛋白濃度(Cpr)
②GSH(μmol/g mass)=[(OD測定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品質量(g)
注意事項:
(1)樣品處理等過程均需要在冰上進行,且須在當日測定酶活力,以免影響其活力測定時,除試劑一外,其它試劑均需放置在冰上;
(2)樣本測定前先取1-2個樣做預實驗,如吸光值太高(超過標準曲線范圍,即y>0.2時),應先用試劑二稀釋到適當倍數(shù),使得吸光值在標準曲線范圍內。
(3)處理后樣品不能用于蛋白濃度測定