目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測(cè)試劑盒>>還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒>> BC1170還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間:2024-08-22 18:59:06瀏覽次數(shù):5155評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號(hào) | BC1170 | 主要用途 | GSH 是細(xì)胞內(nèi)最主要的抗氧化巰基物質(zhì),在抗氧化、蛋白質(zhì)巰基保護(hù)和氨基酸跨膜運(yùn)輸 |
還原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)含量測(cè)定試劑盒說明書
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒?產(chǎn)品簡介:
GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)重要的氧化還原對(duì)之一。因此,測(cè)定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)。
DTNB與GSH反應(yīng)生成復(fù)合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度變化與GSH含量成正比。
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒?試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一×1支,充分溶解于50ml雙蒸水,4℃保存
試劑二×1支,充分溶解于50ml雙蒸水中,4℃保存
試劑三×1支,充分溶解于10ml雙蒸水中,4℃避光保存
還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒?操作步驟:
一、樣品前處理 :
取組織約0.1g,加1ml試劑二,冰上充分研磨,8000rpm 4℃離心10min,取上清。(如上清不清澈,再離心3min)
GSH測(cè)定操作:
測(cè)定前將試劑一于25℃水浴20min
按每100mg組織加入1000µL生理鹽水的比例進(jìn)行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
對(duì)于非哺乳動(dòng)物組織:按每100mg組織加入1000µL提取液的比例進(jìn)行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
(2)血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定操作表:
| 測(cè)定管 | 空白管 |
樣本 | 0.1ml | / |
試劑一 | 0.7ml | 0.7ml |
蒸餾水 | / | 0.1ml |
試劑三 | 0.2ml | 0.2ml |
迅速混勻,于412nm測(cè)吸光值,并記錄第60s的OD值
GSH含量計(jì)算:
GSH標(biāo)準(zhǔn)曲線公式:y=0.0015x+0.0818(x為GSH濃度,y為吸光值)
液體中GSH(μmol/L)=[(OD測(cè)定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)
組織中GSH計(jì)算:
①GSH(μmol/mg prot)=[(OD測(cè)定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品蛋白濃度(Cpr)
②GSH(μmol/g mass)=[(OD測(cè)定管-OD空白管)-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shù)÷樣品質(zhì)量(g)
注意事項(xiàng):
(1)樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測(cè)定酶活力,以免影響其活力測(cè)定時(shí),除試劑一外,其它試劑均需放置在冰上;
(2)樣本測(cè)定前先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如吸光值太高(超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,即y>0.2時(shí)),應(yīng)先用試劑二稀釋到適當(dāng)倍數(shù),使得吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。
(3)處理后樣品不能用于蛋白濃度測(cè)定
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)