目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標檢測試劑盒>>生化試劑盒>> BC0510線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25管/24樣 |
---|---|---|---|
貨號 | BC0510 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 檢測線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性 |
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性檢測試劑盒
分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:2200
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關鍵字:: : : 線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ檢測試劑盒| 線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ|線粒體呼吸鏈|試劑盒
簡要介紹:
復合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱 NADH-CoQ 還原酶或 NADH 脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、 微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,是線粒體內膜中大的蛋白復合物。該酶催化一對電子從 NADH 傳遞給 CoQ,同時可使O2還原生成 O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。 測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS) 生成狀態(tài)。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內容:
提取液:液體25 mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體25 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1支,4℃保存;臨用前加入2mL丙tong
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;溶于1mL丙tong,可分裝后-20℃保存。臨用前再用丙tong100倍稀釋后使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。
試劑四:粉劑×1支,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,現(xiàn)配現(xiàn)用;
工作液的配制:臨用前將試劑二和試劑三1:1混合,現(xiàn)配現(xiàn)用。
產(chǎn)品說明:
復合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,是線粒體內膜中大的蛋白復合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ,同時可使O2還原生成O2-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
復合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測定NADH的氧化速率計算出該酶活性的大小。
試驗中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、丙tong、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、復合體的提?。?/span>
二、測定步驟:
試劑名稱 | 測定管 |
樣本 | 50 |
試劑一 | 770 |
工作液 | 100 |
試劑四 | 80 |
將上述試劑分別加入比色皿后迅速吹打混勻,記錄第10s的吸光值A1,迅速將比色皿連同反應液一起放入37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴中準確反應2分鐘,之后迅速取出比色皿并擦干,記錄2min時的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。 |
三、復合體Ⅰ活力單位的計算:
單位定義:每mg 組織蛋白每分鐘消耗1 nmol 的NADH 定義為一個酶活力單位。
復合體Ⅰ活力(U/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T =1608×ΔA÷Cpr
V 反總:反應體系總體積,10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.05 mL; T:反應時間,2min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL。
注意事項:
A、上清中復合體I活力的計算:
按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織在反應體系中每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
復合體I活性(U/g)= [ΔA1×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W÷V提取×V樣)÷T
=1608×ΔA1÷W。
ΔA1:上清測定值;V 反總:反應體系總體積,10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL ;V 樣:加入樣本體積,0.05mL;T:反應時間,2 min;W:樣本重量,g。
B、沉淀中復合體I活力的計算:
按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織在反應體系中每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
復合體I活性(U/g)= [ΔA2×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W÷V提取×V樣本))÷T
=643×ΔA2÷W。
ΔA2:沉淀測定值;V 反總:反應體系總體積,10-3 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm d:比色皿光徑,1cm;V提?。撼恋碇貞殷w積,0.4mL ;V 樣:加入樣本體積,0.05mL;T:反應時間,2 min;W:樣本重量,g。
C、樣本復合體I總活力的計算:
樣本復合體I總活力即為上清中復合體I活力與沉淀中復合體I活力之和。
按樣本鮮重計算:
復合體I(U/g 鮮重)=1608×ΔA1÷W +643×ΔA2÷W。
相關文獻:
《GSK3β-mediated tau hyperphosphorylation triggers diabetic retinal neurodegeneration by disrupting synaptic and mitochondrial functions》 作者:Huazhang Zhu, Weizhen Zhang, Yingying Zhao, Xingsheng Shu, Wencong Wang, Dandan Wang, Yangfan Yang, Zhijun He, Xiaomei Wang & Ying Ying 期刊:Molecular Neurodegeneration 影響因子:8.274 PMID:30466464
《Weanling Offspring of Dams Maintained on Serine-Deficient Diet Are Vulnerable to Oxidative Stress》 作者:Liuqin He, Haiwen Zhang, and Xihong Zhou 期刊:Oxidative Medicine and Cellular Longevity 影響因子:4.868 PMID:30305866
《A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum》 作者:Qiuli OuYang, Nengguo Tao* and Miaoling Zhang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:29503638
《Age-dependent expression of the Vitamin D receptor and the protective effect of Vitamin D receptor activation on H2O2-induced apoptosis in rat intervertebral disc cells》 作者:TongTonga1ZhihuiLiub1HuaZhangcJingleiSuncDongxiaZhangdFengWangaDechaoMiaoaYongShen 期刊:Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 影響因子:3.785 PMID:30905826
《Roles of TRPA1 and TRPV1 in cigarette smoke -induced airway epithelial cell injury model》 作者:Muyun Wang,Yanbei Zhang,Mengmeng Xu,HaiZhang,Yuqing Chen,Kian Fan Chung,Ian M.Adcock,Feng Li 期刊:Free Radic. Biol. Med. 影響因子:5.657 PMID:30639616
《Nitrogen-doped graphene quantum dots (N-GQDs) perturb redox-sensitive system via the selective inhibition of antioxidant enzyme activities in zebrafish.》 作者:Shun Deng,Ailing Fu,Muhammad Junaid,Yan Wang,Qian Yin,Chen Fu,Li Liu,Dong-Sheng Su,Wan-Ping Bian,De-Sheng Pei 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30925289
《The PI3K/Akt/GSK-3β/ROS/eIF2B pathway promotes breast cancer growth and metastasis via suppression of NK cell cytotoxicity and tumor cell susceptibility》 作者:Fengjiao Jin, Zhaozhen Wu, Xiao Hu, et al. 期刊:Cancer Biol Med 影響因子:4.467 PMID:31119045
《Promotion of Mitochondrial Biogenesis via Activation of AMPK‐PGC1ɑ Signaling Pathway by Ginger (Zingiber officinale Roscoe) Extract, and Its Major Active Component 6‐Gingerol》 作者:Xiaohong Deng , Siwei Zhang, Junzhen Wu , Xianjun Sun , Ziyin Shen, Jingcheng Dong ,Jianhua Huang 期刊:Food Chemistry 影響因子:5.399 PMID:31369153