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產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:360
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: : 谷氨酸檢測試劑盒|Glu檢測試劑盒|谷氨酸|試劑盒
簡要介紹:
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm處吸光度的上升,通過測定340nm吸光度的變化,計算谷氨酸含量。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入40mL試劑一;
試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入2.5mL 試劑二;
標準品:液體0.5mL×1支,4℃保存。10μmol/mL 谷氨酸標準品。
產(chǎn)品說明:
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+,引起340nm處吸光度的上升,通過測定340nm吸光度的變化,計算谷氨酸含量。
試驗中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
操作步驟:
一、谷氨酸提取
細菌、細胞或組織樣品:收集細胞或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每1000萬細菌或細胞加入1mL試劑一,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),10000rpm,常溫離心10min,取上清待測。
稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進行冰浴勻漿,10000 rpm,常溫離心10min,取上清待測。
二、測定步驟
將標準品分別稀釋為2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078、0.039μmol/mL的標準溶液。
(1)標準管:在1 mL石英比色皿中加入200μL標準溶液、800μL試劑三和50μL試劑四混勻,立即記錄340nm處20s時的吸光值為A1和5min20s時的吸光值A(chǔ)2,計算?A=A2-A1。
(2)測定管:在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本、800μL試劑三和50μL試劑四混勻,立即記錄340nm處20s時的吸光值為A1和5min20s時的吸光值A(chǔ)2,計算?A=A2-A1。
三、谷氨酸含量計算
以谷氨酸含量(µmol/mL)為x軸,標準管?A為y軸,繪制標準曲線y=kx+b。將測定管?A帶入方程得到x值。
2、氨基酸含量計算:
(1)按照蛋白濃度計算
谷氨酸含量(µmol/mg prot)=x×V樣本÷(Cpr×V樣本)=x÷Cpr。
(2)按照樣品質(zhì)量計算
谷氨酸含量(µmol/g鮮重)=x×V樣本÷(W÷V樣總×V樣本)=x÷W。
(3)按照細菌或細胞密度計算
谷氨酸含量(μmol/104 cell)=x×V樣本÷(1000÷V樣總×V樣本)=0.001x。
V樣總:加入提取液體積,1mL;V樣本:加入的樣本體積,0.2mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g;1000:細菌或細胞總數(shù),1000萬。
注意事項:
為提高檢測靈敏度,測定管的吸光值應(yīng)小于1且?A小于0.4,若大于此值則需要將上清液用試劑一稀釋適當倍數(shù)后測定。
谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒
相關(guān)文獻:
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Muhammad Ali Abid,Muhammad Askari,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: