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實(shí)驗(yàn)用水的等級(jí)
日常工作中，經(jīng)常會(huì)用到純水，比如：凍干質(zhì)控品的復(fù)溶，濃縮清洗液的稀釋，試劑的配制，儀器管路的沖洗等，純水每天都在大量參與、影響到我們的檢驗(yàn)工作，但我們大部分人對(duì)純水的了解僅停留在“去離子水”上，對(duì)其制備、分級(jí)、使用以及對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響理解的并不充足。
在一些出現(xiàn)異常檢驗(yàn)結(jié)果、定標(biāo)、質(zhì)控不好，檢查儀器、試劑、質(zhì)控品后仍沒能解決時(shí)，需要考慮水的影響，很可能是水質(zhì)污染進(jìn)而污染分析系統(tǒng)導(dǎo)致上述問題，隨著檢驗(yàn)技術(shù)不斷進(jìn)步，標(biāo)本和試劑消耗量越來越少，只需要幾十甚至幾微升，儀器內(nèi)部管路設(shè)計(jì)也越來越精密，使得分析過程中水的影響所占比重越來越大。而檢驗(yàn)科任務(wù)繁重，標(biāo)本量大，對(duì)儀器保養(yǎng)維護(hù)通常不能做到盡善盡美，從而水不斷影響檢驗(yàn)工作。
我國(guó)規(guī)定實(shí)驗(yàn)用水分三級(jí)。一級(jí)水用于有嚴(yán)格要求、需要zui小程度干擾的分析實(shí)驗(yàn)，包括對(duì)顆粒有要求的實(shí)驗(yàn)。二級(jí)水用于常規(guī)檢測(cè)。三級(jí)水常用用于玻璃器皿的預(yù)洗。臨床檢驗(yàn)科使用的是二級(jí)純水，由純水機(jī)以離子交換方式制得。
表1. 三級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)
I級(jí) | II級(jí) | III級(jí) | |
zui低電阻率(MΩ .cm 25℃) | 10 | 1 | 0.1 |
微生物數(shù)量（CFU/ml） | 10 | 1000 | - |
硅酸鹽zui大含量（mg/L） | 0.05 | 0.1 | 1 |
PH | - | - | 5.0-8.0 |
顆粒物 | 0.22μm filter | - | - |
有機(jī)物 | 活性炭，蒸餾，反滲透 | - | - |
注：“-“為未做規(guī)定
純水機(jī)上zui常見到的信息是電阻率，是通過檢測(cè)正負(fù)兩個(gè)電極間純水的微電流強(qiáng)度，來推算純水中的總離子強(qiáng)度，常規(guī)臨床實(shí)驗(yàn)室大于1便可達(dá)標(biāo)。純水水質(zhì)需定期檢測(cè)，檢測(cè)頻度及內(nèi)容根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的原水狀況及需要而不同，實(shí)驗(yàn)室水質(zhì)檢測(cè)至少應(yīng)包括電阻率、微生物培養(yǎng)及硅酸鹽，其他指標(biāo)可實(shí)驗(yàn)室自行決定，同時(shí)建議水質(zhì)檢測(cè)記錄作為質(zhì)控記錄的一部分共同存檔備查。
水質(zhì)量不合格也就意味著純水系統(tǒng)水純化的失敗，可能出現(xiàn)在原水預(yù)處理過程、三級(jí)純水的儲(chǔ)存和離子交換過程中的任何一步。無論哪一步失敗，其雜質(zhì)來源無外乎自來水和純水機(jī)水通道的污染物，主要有：
1. 電解質(zhì)：zui直接的影響就是對(duì)血清(漿)中同種離子測(cè)定結(jié)果的升高，如對(duì)Mg2+，Ca2+，F(xiàn)e3+，Cu2+，Zn2+等的測(cè)定，同時(shí)也對(duì)這些項(xiàng)目的定標(biāo)產(chǎn)生影響．由于很多金屬離子都是酶的輔因子，因此當(dāng)金屬離子含量高時(shí)往往影響酶活性的檢測(cè)(如Mg2+是多種磷酸化激酶的激活劑，水中含量超標(biāo)時(shí)會(huì)導(dǎo)致這些酶活性測(cè)定值的升高；而許多重金屬離子則對(duì)酶有抑制作用，導(dǎo)致酶活性下降)。很多陰離子也作為酶的輔因子存在，對(duì)酶活性測(cè)定產(chǎn)生影響(如Cl-對(duì)α-淀粉酶就有激活作用)。電解質(zhì)含量高的水更容易形成結(jié)晶和導(dǎo)致蛋白等有機(jī)物變性附著于管道系統(tǒng)，從而使得生化分析儀管道系統(tǒng)更易堵塞，zui終造成測(cè)定失真或失??；同時(shí)，在使用其對(duì)反應(yīng)杯進(jìn)行清洗時(shí)也很難清洗，會(huì)加速反應(yīng)杯的老化和損壞。
2. 有機(jī)物：有機(jī)物質(zhì)的影響主要在于對(duì)類似物質(zhì)測(cè)定時(shí)導(dǎo)致類似物質(zhì)測(cè)定結(jié)果的升高。同時(shí)，有機(jī)物含量升高也會(huì)加速管道系統(tǒng)和反應(yīng)杯的清洗困難及老化。
3. 顆粒物：顆粒物一般很難通過純水系統(tǒng)進(jìn)入生化分析儀管道和反應(yīng)系統(tǒng)，其來源一般都是三級(jí)純水或一級(jí)純水的儲(chǔ)水箱發(fā)生二次污染，但是一旦進(jìn)入除了會(huì)導(dǎo)致吸光度升高外，還很容易堵塞管道和損壞反應(yīng)杯。
4. 微生物：微生物的去除主要依賴原水的預(yù)處理，有些純水系統(tǒng)還在一級(jí)純水或超純水處加裝紫外殺菌或者微濾、超濾等裝置，迸一步除去水中殘余的細(xì)菌、微粒、熱源等。但一旦預(yù)處理失敗或純水儲(chǔ)存箱被二次污染，微生物及其產(chǎn)物就能進(jìn)入生化分析儀管道系統(tǒng)和反應(yīng)系統(tǒng)，可能出現(xiàn)的情況有兩種：①微生物在管道及反應(yīng)系統(tǒng)孽生，導(dǎo)致管道堵塞，同時(shí)令吸光度和杯空白升高；②微生物產(chǎn)生特定的酶對(duì)生化分析儀酶測(cè)定產(chǎn)生影響，具體產(chǎn)生什么影響取決于污染菌的類型。
5. 溶解氣體：如CO2，Cl2，H2S等溶解增多導(dǎo)致水pH值的下降，也對(duì)pH值依賴性較強(qiáng)的生化項(xiàng)目測(cè)定產(chǎn)生影響；某些氣體如Cl2增多，因其自身氧化性較強(qiáng)，會(huì)對(duì)與氧化還原反應(yīng)相關(guān)的生化測(cè)定項(xiàng)目產(chǎn)生影響，如對(duì)基于340nm處NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT，AST，BUN等的測(cè)定方法，會(huì)導(dǎo)測(cè)定值的升高。
純水的分裝與儲(chǔ)存也很重要。制備好的純水通常貯存在一較大容器內(nèi)，由于空氣中村在懸浮顆粒、有機(jī)物、微生物等各種污染物，當(dāng)空氣從蓋子縫隙進(jìn)入會(huì)對(duì)水質(zhì)造成影響，因此不能將水廠時(shí)間貯存，當(dāng)容器中的水取出放入一個(gè)二級(jí)容器中（比如燒瓶）中使用時(shí)，二級(jí)容器中的水必須每天更換，未用完的水不能倒回原容器。此外容器應(yīng)選用能防止化學(xué)或微生物污染的材質(zhì)。