上一篇推文,介紹了WIGGENS的CGQ生物量在線監(jiān)測系統(tǒng),在微生物(細(xì)胞)效能評價(jià)/菌種篩選的應(yīng)用。
本期介紹生物量監(jiān)測在微生物(細(xì)胞)培養(yǎng)條件優(yōu)化中的應(yīng)用。培養(yǎng)基為微生物(細(xì)胞)的生長提供環(huán)境條件以及碳源,氮源,生長因子等。培養(yǎng)基具有通用性,但每種培養(yǎng)物都有特殊性。在通用培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上針對培養(yǎng)物的特性做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整或成分添加,對目的產(chǎn)物的產(chǎn)出,具有重要正作用。
下圖是德國法蘭克福歌德大學(xué),使用CGQ生物量監(jiān)測系統(tǒng)對Saccharomyces cerevisiae (一種釀酒酵母)在不同碳源組分中的生長曲線。
三種碳源Glc(葡萄糖)、Gal(半乳糖)、Mal(酰胺)不同濃度對釀酒酵母的生長有著明顯的影響,對遲緩期和對數(shù)期的影響顯著。碳源各組分濃度不同,對釀酒酵母進(jìn)入平臺期的時(shí)間甚至有超過6小時(shí)的差距影響。這對注重效率的工業(yè)發(fā)酵來說,減少遲緩期的時(shí)間段,有著重要的參考意義。
下圖是,在M9培養(yǎng)基中,通過加入不同濃度的甘油,Escherichia coli (大腸桿菌)的生長曲線
從上圖大腸桿菌的生長曲線可以看出,在M9培養(yǎng)基中,甘油濃度是對大腸桿菌終生長量的大影響因素。0.4%的甘油濃度對比0.1%的甘油濃度,對數(shù)生長期有明顯提升,終得到的生物量也是低濃度甘油的4倍以上。
下圖是通過培養(yǎng)過程的搖瓶補(bǔ)液,CGQ進(jìn)行的實(shí)時(shí)生物量監(jiān)測。
在大腸桿菌培養(yǎng)中,通過LIS搖瓶補(bǔ)液系統(tǒng),在搖瓶培養(yǎng)過程中進(jìn)行在線補(bǔ)入緩沖液,緩沖液對pH值進(jìn)行了調(diào)節(jié)。在使用LB培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌的過程中,對生物量的限制的大因素不是培養(yǎng)基組分,而是pH值,持續(xù)的進(jìn)行pH調(diào)節(jié),可以有效的增加生物量,提高培養(yǎng)基的利用率。
更多的CGQ生物量監(jiān)測應(yīng)用,請參考如下文獻(xiàn):
[1]Tripp et al (2017):Establishing a yeast-based screening system for discovery of human GLUT5inhibitors and activators (Nature – Scientific Reports)
[2]Bruder, S. &Boles, E. (2017): Improvement of the yeast based (R)-phenylacetylcarbinol productionprocess via reduction of by-product formation (Biochemical EngineeringJournal).
[3]Gottardi et al. (2017):De novo biosynthesis of trans-cinnamicacidderivatives in Saccharomycescerevisiae (AppliedMicrobiology and Biotechnology).
[4]Bracharz et al. (2017):The effects of TORC signal interference on lipogenesis in theoleaginous yeast Trichosporonoleaginosus (BMCBiotechnology).
[5]Bruder et al. (2016):Parallelised onlinebiomass monitoring in shake flasks enables efficient strain and carbon sourcedependent growth characterisation of Saccharomycescerevisia (MicrobialCell Factories).
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