色譜柱是液相的心臟，在液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命是非常重要。色譜柱壓力過高、過低都屬于柱壓問題。色譜柱壓升高一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì)，造成流體阻力加大所致。我們的色譜工程師大致總結(jié)為以下幾個方面：

1、流動相的前處理：流動相或楊平中雜質(zhì)堵塞色譜柱進口濾片，導致壓力升高。這是由于流動相可能沒有過濾，或過濾不*，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所致。另一個方面也可能沒有使用預(yù)保護柱所致。

2、樣品的沉淀：當流動相與溶解樣品的溶劑不一致時，樣品進入色譜柱時，可能因溶解度降低而沉淀出來吸附于柱內(nèi)，造成壓力升高。

3、晶體的析出：使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出阻塞而壓力升高。

4、細菌或霉菌孳生：流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長霉菌堵塞濾板，導致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

 5、溶質(zhì)吸附：一些溶質(zhì)在色譜柱上有較強大的吸附力，洗脫時流動相也難以清除掉，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大從而造成壓力升高。

 6、流動相更換過度較快：當改變流動相體系時，不*的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。 

7、壓力脈沖：運行過程中，有時會產(chǎn)生整個液相色譜儀系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如泵壓力變化，此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。

    以上幾種出現(xiàn)液相色譜儀柱壓升高的原因，我們的色譜工程師提出解決方法：

    處理對于緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)的情況先用40～50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；如果柱壓還是降不下來，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。

   對于樣品污染沉積的情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

   液相色譜儀柱壓過低的現(xiàn)象一般是由于色譜系統(tǒng)泄漏造成的，其處理方法：尋找各個接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。

    另外還有一中可能是柱壓不穩(wěn)，忽高忽低，更嚴重一點會導致泵無法吸上液體，原因就是泵里進了空氣。處理方法：打開Purge閥，用3-5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用針筒在排空閥處借助外力吸出氣泡。