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        1. 上海信裕生物科技有限公司
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          當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒

          非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒

          參   考   價(jià): 1990 1790

          訂  貨  量: 1-4  臺 ≥5  臺

          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          產(chǎn)品型號50次

          品       牌其他品牌

          廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

          所  在  地上海

          更新時(shí)間:2020-07-21 15:30:33瀏覽次數(shù):567次

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          供貨周期 一周 規(guī)格 50T
          貨號 XY-0033 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
          主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。
          非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個(gè)亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

          非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒

          African Horse Sickness Virus(AHSV)

          產(chǎn)品及特點(diǎn)

          非洲馬瘟病毒(African Horse Sickness Virus,AHSV)會引起非洲馬瘟,是 一種馬屬動物的急性或亞急性傳染病,該病以發(fā)熱、皮下結(jié)締組織與肺水腫以及 內(nèi)臟出血為特征,只能通過昆蟲傳播。馬對此病的易感性高,病死率高達(dá) 95%。 本病發(fā)生有明顯的季節(jié)性和地域性,多見于溫?zé)岢睗窦竟?jié),常呈地方流行或暴發(fā) 流行,傳播迅速,因此靈敏快捷的診斷產(chǎn)品具有重要的意義。為此本公司開發(fā)了 本產(chǎn)品,可用于在科研領(lǐng)域快速定量檢測非洲馬瘟病毒。它具有下列特點(diǎn):

          1. 一站式,用戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,包括引物和對照。

          2. 根據(jù)非洲馬瘟病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物,具有良好的特異性。

          3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng)。

          4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成,不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

          5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

          6. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。

          非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

          編號

          成分

          規(guī)格

          試劑一

          5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

          200 μL(橘黃蓋)  

          試劑二

           MMLV-Taq Mix

          75 μL(紅蓋) 

          試劑三

          超純水

          1 mL(亮黃蓋)

          試劑四

          非洲馬瘟病毒 RT-PCR 引物混合液 

          100 μL白蓋) 

          試劑五 非洲馬瘟病毒 RT-PCR 陽性對  50 μL(黃蓋)

          試劑六

          使用手冊

          1 份

          運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 12 個(gè)月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞?,造成假陽性?nbsp;

          自備試劑 樣品 DNA。

          使用方法 一、樣品 DNA 的制備

          1. 如果有 N 個(gè)樣品,必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽性 對照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 非洲馬瘟病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液作為制備的陽性對照。可以用水作為制備的陰性 對照。制備所得成為樣品 RNA。

          2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

          二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系)

          3. 如果有 N+2 個(gè)樣品,則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管(額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽性對照,另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分: 

          成分

          樣品管 N+2 個(gè)

          PCR 陰性 對照管

          標(biāo)準(zhǔn)曲線 樣品管(2-7 管)

          5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

          4 μL

          4 μL

          4 μL

          非洲馬瘟病毒 RT-PCR 引物混合液

          2 μL

          2 μL

          2 μL

           N+2 個(gè)制備的 RNA 樣品12.5 μL   

          超純水

           

           12.5 μL

           

           非洲馬瘟病毒 RT-PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液    12.5 μL
          MMLV-Taq Mix  1.5 μL 1.5 μL 1.5 μL

          4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR,RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

          過程

          溫度

          時(shí)間

          逆轉(zhuǎn)錄

          42℃

          30 min

           預(yù)變性 95℃ 5 min

           

          PCR 反應(yīng)

          35個(gè)循環(huán)

          95℃ 

          30 sec

           58℃30 sec

          72℃ 

          20 sec

           延伸 72℃ 7 min

           

          5. 瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增效果。如果陰性對照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對照無擴(kuò)增產(chǎn)物, 則說明實(shí)驗(yàn)失敗,需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴(kuò)增產(chǎn)物、 陽性對照必須有預(yù)期條帶出現(xiàn),才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,如果有預(yù)期 片段大小的擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性,如果無則為陰性。

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