煙曲霉PCR試劑盒

Aspergillus fumigatus

產(chǎn)品及特點

煙曲霉(Aspergillus fumigatus.)屬殼霉目、杯霉科、煙曲霉屬，是一種重 要的致病菌，也是引起食品的一種真菌。煙曲霉的菌落生長迅速，絨狀或 作一定的絮狀，暗煙綠色，老后色變得更深。此菌嗜高溫，在 45℃或更高的溫 度下生長茂盛。在糧食發(fā)熱霉變的中期和后期常大量出現(xiàn)，促進糧溫的升高和 敗壞。煙曲霉能寄生在人、鳥類及其它脊椎動物的肺部引起結核癥。也能侵染 棉鈴和蘋果等，引起果實腐爛，或寄藏于種子上。因此快速檢測煙曲霉具有重 要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供細菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增氣單胞菌 DNA，跟其他微生物無交 叉反應。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

煙曲霉PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作 為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)細菌 DNA 提取試 劑盒兼容。也可以選購本公司的細菌 DNAout 或柱式細菌 DNAout。本試 劑盒免費贈送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑，本產(chǎn)品的裂解液可 以直接作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。

二、設置 PCR 反應（40 μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴 增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。