曲霉屬通用PCR試劑盒

Aspergillus spp. 

產(chǎn)品及特點

曲霉屬，曲霉目中的一屬，包括米曲霉、黑曲霉等。一方面有很多菌種可 被用于各種有益物質(zhì)的生產(chǎn)，如用于蛋白消化劑的蛋白酶（醬油曲霉）、檸檬 酸（黑曲霉）、衣康酸（土曲霉、解烏頭酸曲霉）以及曲酸（黃曲霉）等。但另 一方面，也有不少侵害家禽、家畜甚至人體內(nèi)臟特別是呼吸器官的病菌，如引 起曲霉癥的煙曲霉等。因此快速靈敏檢測曲霉屬具有重要意義。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的曲霉屬通用檢測試劑盒，它具有下列特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增曲霉屬，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

曲霉屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 曲霉屬通用 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液而 得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上 待用。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴 增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。