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        1. 上海信裕生物科技有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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          當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次皰疹病毒LAMP試劑盒

          皰疹病毒LAMP試劑盒

          參   考   價(jià): 3490 3290

          訂  貨  量: 1-4  件 ≥5  件

          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          產(chǎn)品型號(hào)50次

          品       牌其他品牌

          廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

          所  在  地上海

          更新時(shí)間:2020-07-23 16:00:09瀏覽次數(shù):435次

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          供貨周期 一周 規(guī)格 50T
          貨號(hào) XY-0090 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
          主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。
          皰疹病毒LAMP試劑盒會(huì)引起鮑病毒病,危害的主要對(duì)象是我國(guó) 南方養(yǎng)殖的九孔鮑、雜色鮑,北方地區(qū)養(yǎng)殖的皺紋盤(pán)鮑。該病潛伏期短,發(fā)病急,傳染 性強(qiáng),死亡率高,造成鮑種苗及成鮑的大量死亡,4~30d 內(nèi)死亡率高達(dá) 95%以上,溶 藻膠弧菌和副溶血弧菌可能會(huì)和病毒共同感染鮑并且是鮑病的共同致病因子。

          皰疹病毒LAMP試劑盒

          B Virus(BV)B

          產(chǎn)品及特點(diǎn)

          B 皰疹病毒(B Virus,BV)又稱(chēng)猴皰疹病毒 I 型,其因感染猴類(lèi)而得名, 但是當(dāng)人被感染 BV 的猴咬或抓傷后也可發(fā)生皮膚損害,會(huì)出現(xiàn)淋巴結(jié)炎及流 感樣綜合征,甚而并發(fā)病毒性腦炎。發(fā)病部位主要是皮膚、淋巴,相關(guān)癥狀為 口咽部水皰狀損害、疲勞、肌痛、皰疹,同時(shí)也會(huì)帶來(lái)頭痛的并發(fā)疾病,對(duì)人 體健康具有重要危害,因此 B 皰疹病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有 著重要作用。本公司在自己開(kāi)發(fā)的技術(shù)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)了簡(jiǎn)單快捷的 B 皰疹病 毒雙染料 LAMP 試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

          1. 一般 60 分鐘內(nèi)出結(jié)果(取決于靶分子濃度),比 PCR 快約 1 小時(shí)。

          2. 對(duì) 20 μL 的反應(yīng)體系,大樣品加樣量達(dá)到 14 μL。

          3. 含可見(jiàn)光和熒光染料,既可以用金屬浴和水浴擴(kuò)增用可見(jiàn)光肉眼判斷結(jié)果, 也可用熒光 PCR 儀進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)。

          4. 內(nèi)含的 dUTP-UNG 可防交叉污染。

          5. 特異性比 PCR 高,因?yàn)?LAMP 擴(kuò)增使用 4-6 條引物而不是兩條。

          6. 假陰性率低。

          7. 提供無(wú)傳染性的陽(yáng)性對(duì)照,便于分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

          8. 只可用于科研,只可進(jìn)行定性檢測(cè),不能用于定量檢測(cè)。

          9. 本產(chǎn)品只適用于 LAMP 檢測(cè),不適用于進(jìn)行 RT-LAMP 檢測(cè)。

          10. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20 μL 體系的 LAMP 擴(kuò)增和檢測(cè)反應(yīng)。

          皰疹病毒LAMP試劑盒規(guī)格及成分

          編號(hào)

          成  份

          規(guī)格

          試劑一

          4×雙染料 LAMP MagicMix

          250 μL(綠蓋)

          試劑二

          20×B 皰疹病毒 LAMP 引物混合 液

          50 μL(白蓋)

          試劑三

          B 皰疹病毒 LAMP 陽(yáng)性對(duì)照 (1×10E3 拷貝/μL)

          150 μL(黃蓋)

          試劑四

          超純水

          1 mL(亮黃蓋)

          試劑五

          使用手冊(cè)

          1 份

          運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照單獨(dú)放置,不要污染其 他試劑。 

          自備試劑 樣品RNA

          使用方法 一、樣品 DNA 的制備

          1. 用自選方法純化樣品 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù) DNA 提取試劑盒兼 容。

          2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)樣品制備,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì) 照(PC)和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照(NC)。樣品使用量根據(jù)所選擇的試劑 盒決定。如果樣品使用量為 XmL,則在 XmL 水中加 10 μL 試劑盒提供的 陽(yáng)性對(duì)照(1 萬(wàn)拷貝),樣品制備陰性對(duì)照是直接用 X mL 水作為陰性對(duì)照, 然后和 N 個(gè)樣品一起進(jìn)行 DNA 提取操作,得到 N+2 個(gè) DNA 樣品。

          二、雙染料 LAMP 擴(kuò)增及檢測(cè)(20μL 體系)

          3. 反應(yīng)設(shè)置:如果有 N+2 個(gè) DNA 純化樣品,則設(shè)置 N+4 個(gè) LAMP 擴(kuò) 增,增加 LAMP陰性對(duì)照和 LAMP 陽(yáng)性對(duì)照各1個(gè)。在 N+4個(gè) 0.2mL PCR 管中加入下列成分:

          成分

          N+2個(gè)制備所得樣品

          LAMP 陰性對(duì)照

          LAMP 陽(yáng)性對(duì)照

          4×雙染料 LAMP MagicMix

          5 μL

           5 μL

           5 μL

          20×B 皰疹病毒 LAMP 引物混 合液

           1μL?

          1 μL

          1 μL

          N+2 個(gè)樣品 DNA

          14 μL

           

           

           超純水

           

          14 μL

          4 μL

           B 皰疹病毒陽(yáng)性對(duì)照 (1×10E3 拷貝/μL)   10 μL

          4. 置混勻后進(jìn)行擴(kuò)增。由于本產(chǎn)品含雙染料,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選擇下列 兩種方式進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。

          5. 如果使用金屬浴或水浴,則必須先在每個(gè)反應(yīng)管中加 30 μL 石蠟油,否則 保溫期間反應(yīng)體系的水分會(huì)蒸發(fā),影響反應(yīng)效率。65℃保溫 120 分鐘。

          6. 如果使用熒光定量 PCR 儀:設(shè)聚合溫度 65℃,1 次循環(huán) 1 分鐘,120 個(gè) 循環(huán),每分鐘在 FAM 通道采集一次熒光信號(hào)。

          三、結(jié)果分析及解讀

          7. 如果是用水浴或金屬浴進(jìn)行的擴(kuò)增,反應(yīng)結(jié)束后只能肉眼判斷結(jié)果。將反 應(yīng)管放置在白色背景(如白紙)前觀察。擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照管內(nèi)反應(yīng)液將呈現(xiàn) 藍(lán)色,無(wú)模板和無(wú)引物的陰性對(duì)照將呈淺藍(lán)色。如果擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照管內(nèi)反 應(yīng)液不呈現(xiàn)藍(lán)色,或無(wú)模板和無(wú)引物的陰性對(duì)照任何一個(gè)呈現(xiàn)藍(lán)色,則說(shuō) 明試劑有問(wèn)題,實(shí)驗(yàn)無(wú)效。請(qǐng)跟廠家聯(lián)系。

          8. 如果實(shí)驗(yàn)有效,則樣品管的顏色接近擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照管則說(shuō)明有擴(kuò)增,如果 接近無(wú)模板和無(wú)引物的陰性對(duì)照,則說(shuō)明無(wú)擴(kuò)增。反應(yīng)結(jié)果示例如下(9 為陰性,10 為陽(yáng)性):

          9. 反應(yīng)結(jié)束后,如是用熒光 PCR 儀擴(kuò)增,則可分析擴(kuò)增曲線和 Ct。試劑盒 提供的陽(yáng)性對(duì)照的 Ct 將小于 60,如果大于 60,說(shuō)明試劑可能失效,需跟 廠家聯(lián)系。無(wú)模板陰性對(duì)照和無(wú)引物陰性對(duì)照的 Ct 將大于 120。如果任 何小于 60,則說(shuō)明試劑或環(huán)境被污染,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)或跟廠家聯(lián)系。如果對(duì) 照結(jié)果正常,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)有效,再分析樣品。樣品的 Ct 在 60 以下的為陽(yáng)性, 90 以上的為陰性,60-90 之間的為疑難樣品,需要重復(fù)一次,如果還在 60-90,需要電泳檢測(cè)。

          10. 當(dāng)實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)和可視化檢測(cè)同時(shí)使用時(shí),如果不一致,以實(shí)時(shí)熒光 LAMP 的數(shù)據(jù)為準(zhǔn)。一般可視化結(jié)果滯后實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)結(jié)果 20-30 分鐘,也就是 說(shuō),在 qPCR 儀上第 30 分鐘時(shí)呈現(xiàn)陽(yáng)性的樣品,其顏色變化在第 50-60 分鐘時(shí)才能觀察到。

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