蠟狀芽孢桿菌PCR試劑盒

Bacillus cereus

產(chǎn)品及特點

芽孢桿菌屬(Bacillus)中的一種。菌體細(xì)胞桿狀，末端方，成短或長鏈， 1.0~1.2×3.0~5.0 微米。產(chǎn)芽孢，芽孢圓形或柱形，中生或近中生，1.0~1.5 微米， 孢囊無明顯膨大。革蘭氏陽性，無莢膜，運動。菌落大，表面粗糙， 扁平，不規(guī)則。會引起食物中毒，中毒者癥狀為腹痛、嘔吐腹瀉。蠟狀芽孢桿 菌可產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的營養(yǎng)成分，改善 生態(tài)環(huán)境。可產(chǎn)生細(xì)菌蛋白酶；可用于麻脫膠，是各種抗生素抗菌活性的測 定菌?？捎糜诿髂z液化，牛奶胨化，還原硝酸鹽，水解淀粉。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的蠟狀芽孢桿菌檢測試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴蠟狀芽孢桿菌，與其他病原沒有交叉 反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

蠟狀芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。