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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次枯草芽孢桿菌PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-07-23 17:08:12瀏覽次數(shù):457次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | XY-0106 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。 |
枯草芽孢桿菌PCR試劑盒
Bacillus subtilis
產(chǎn)品及特點(diǎn)
枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)是芽孢桿菌屬的一種,它們對(duì)外界有害因 子抵抗力強(qiáng),分布廣,存在于土壤、水、空氣以及動(dòng)物腸道等處,具有繁殖快 速、生命力強(qiáng)、耐強(qiáng)酸、耐強(qiáng)堿、抗菌消毒、耐高氧(嗜氧繁殖)、耐低氧 (厭氧繁殖)等特點(diǎn),枯草芽孢桿菌在生物肥發(fā)酵或發(fā)酵床制作中應(yīng)用相當(dāng) 廣泛,可用于畜牧水產(chǎn)飼料添加劑、用于水環(huán)境凈化,是一種多功能的微生 物,也可以與多種菌種混配,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有重要作用,還可以幫助消化, 是一種消化道益生菌,因此快速檢測(cè)枯草芽孢桿菌具有重要意義。本產(chǎn)品是 根據(jù) PCR 原理開發(fā)的鉤端螺旋體的檢測(cè)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)枯草芽孢桿菌,與其他病原沒有交叉 反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
枯草芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃色) |
試劑三 | 枯草芽孢桿菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 枯草芽孢桿菌 PCR 陽性對(duì)照(1 ×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 枯草芽孢桿菌 PCR 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個(gè) | PCR 陰性 對(duì)照管 | PCR 陽性 對(duì)照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
枯草芽孢桿菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對(duì)照(水) |
| 18 μL |
|
PCR 陽性對(duì)照(枯草芽孢桿菌 PCR 陽性對(duì)照的 10000 倍稀釋液) |
18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 30 secc |
65℃ | 30 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測(cè)
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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