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當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次索氏梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-07-29 15:11:27瀏覽次數(shù):411次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0210 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
索氏梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒
Clostridium sordellii
產(chǎn)品及特點
索氏梭狀芽孢桿菌(Clostridium sordellii)是引起肺炎,關(guān)節(jié)炎、腹膜 炎 和心內(nèi)膜炎的病原菌,常感染產(chǎn)婦、流產(chǎn)產(chǎn)婦,注射吸毒犯等人員,因此索 氏 梭狀芽孢桿菌快速檢測具有重要的意義。本試劑盒就是為此目得根據(jù) PCR 原 理開發(fā),它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增索氏梭狀芽孢桿菌,但跟其他微生 物無交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
索氏梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 索氏梭狀芽孢桿菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 索氏梭狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | PCR 陽性 對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
索氏梭狀芽孢桿菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(超純水) |
| 18 μL |
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PCR 陽性對照(索氏梭狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應 (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
60℃ | 30 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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