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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-07-29 15:50:15瀏覽次數(shù):417次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | XY-0219 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。 |
牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒
Contagious Bovine Pleuropneumonia (CBPP)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
牛傳染性胸膜肺炎(又稱牛肺疫)是由絲狀支原體絲狀亞種引起的一種高 度接觸性傳染病,以滲出性纖維素性肺炎和漿液纖維素性胸膜肺炎為特征。本 病易感動(dòng)物主要是牦牛、奶牛、黃牛、水牛、犏牛、馴鹿及羚羊。各種牛對(duì)本 病的易感性,依其品種、生活方式及個(gè)體抵抗力不同而有區(qū)別,發(fā)病率為 60%-70%,病死率約 30%-50%,山羊、綿羊及駱駝在自然情況下不易感染, 其他動(dòng)物及人無(wú)易感性。主要傳染源是病牛及帶菌牛。據(jù)報(bào)道,病??祻?fù) 15 個(gè)月甚至 2-3 年后還能感染健牛。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)檢測(cè)牛傳染性 胸膜肺炎的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增牛傳染性胸膜肺炎,但跟其他微生 物無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
牛傳染性胸膜肺炎PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 牛傳染性胸膜肺炎 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 牛傳染性胸膜肺炎 PCR 陽(yáng)性對(duì)照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) | 20 次(1 mL,綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一 個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個(gè) | PCR 陰性 對(duì)照管 | PCR 陽(yáng)性 對(duì)照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
牛傳染性胸膜肺炎PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對(duì)照(超純水) |
| 18 μL |
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PCR 陽(yáng)性對(duì)照(牛傳染性胸膜肺炎 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 10 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過(guò)程 | 溫度 | 時(shí)間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 15 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測(cè)
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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