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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次牛棒桿菌PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-07-29 15:56:42瀏覽次數(shù):393次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0220 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。 |
牛棒桿菌PCR試劑盒
Corynebacterium bovis
產(chǎn)品及特點(diǎn)
牛棒狀桿菌病(Bovine Corynebacteriosis)是指由棒狀桿菌屬(Coryne bacterium SPP.)的某些細(xì)菌引起的膀胱炎和腎盂腎炎。臨床主要特征為頻尿、濁尿、血尿和發(fā)熱。該病主要見于成年母牛,多在妊娠期和產(chǎn)后發(fā)病。本病分布于世界各地。本產(chǎn)品是根據(jù)PCR原理開發(fā)的牛棒桿菌檢測試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增牛棒桿菌。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
牛棒桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 牛棒桿菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 牛棒桿菌 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 使用手冊 | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一 個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對 N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性 對照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個(gè) 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
牛棒桿菌 PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2個(gè)樣品DNA模板 | 各18 μL | - | - |
PCR陰性對照(水) | - | 18 μL | - |
PCR陽性對照(牛棒桿菌PCR陽性對照的10000倍稀釋液) | - | - | 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 25 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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