細(xì)粒棘球絳蟲PCR試劑盒

Echinococcus granulosus

產(chǎn)品及特點(diǎn)

細(xì)粒棘球絳蟲（Echinococus granulosus）成蟲寄生在犬科食肉動(dòng)物， 幼蟲（稱棘球蚴）寄生于人和多種食草類家畜，以及其它動(dòng)物，引起一種嚴(yán)重 的人獸共患病，稱棘球蚴病或包蟲?。╡chinococcosis，hydatid disease， hydatidosis）。棘球蚴病分布地域廣泛。隨著世界畜牧資源的開發(fā)而不斷擴(kuò)散， 現(xiàn)已成為性的公共衛(wèi)生問題。因此快速準(zhǔn)確診斷細(xì)粒棘球絳蟲具有重要意 義。為此本公司基于 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。

2. 根據(jù)細(xì)粒棘球絳蟲保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與其他微生物無交叉反應(yīng)

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

細(xì)粒棘球絳蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用 10μL 陽性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。