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        1. 上海信裕生物科技有限公司
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          當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒

          口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒

          參   考   價: 1990 1790

          訂  貨  量: 1-4  件 ≥5  件

          具體成交價以合同協(xié)議為準

          產(chǎn)品型號50次

          品       牌其他品牌

          廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

          所  在  地上海

          更新時間:2020-08-03 09:29:45瀏覽次數(shù):445次

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          供貨周期 一周 規(guī)格 50T
          貨號 XY-0326 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
          主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。
          口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

          口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒

          Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)

          產(chǎn)品及特點

          口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)會引發(fā)口蹄疫,易 感染的動物是黃牛等;野生動物也易感染此病??谔阋咴趤喼?、非洲和中東以及 南美均有流行,口蹄疫發(fā)病后一般不致死,但會使病獸的口、蹄部出現(xiàn)大量水皰, 高燒不退,使實際畜產(chǎn)量銳減。另外,有個別口蹄疫病毒的變種可傳染給人。因 此,每次爆發(fā)后只能屠宰和集體焚毀染病牲畜以*患。由于口蹄疫傳播迅速、 難于防治、補救措施少,被稱為畜牧業(yè)的“*殺手”,因此快速靈敏診斷具有 重要意義。本產(chǎn)品根據(jù) PCR 原理開發(fā),可用于科研領(lǐng)域快速檢測口蹄疫病毒。 它具有下列特點: 

          1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。

          2. 根據(jù)口蹄疫病毒 O 亞型的保守基因序列設(shè)計的引物,具有良好的特異性。

          3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng)。

          4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成,不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

          5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

          6. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。

          口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

          編號

          成  份

          規(guī)格

          試劑一

          5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

          200 μL(橘黃蓋)

          試劑二

          MMLV-Taq Mix

          75 μL(紅蓋)

          試劑三

          超純水 

          1 mL(亮黃蓋)

          試劑四

          口蹄疫病毒通用  RT-PCR 引物 混合液 

          100 μL(白蓋)

          試劑五

          口蹄疫病毒通用  RT-PCR 陽性 對照(1×10E8 拷貝/μL) 

          50 μL(黃蓋)

          試劑六 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) 20 次(1mL,綠蓋)
          試劑七

          使用手冊 

          1 份

          運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。 

          自備試劑 樣品 RNA

          使用方法 一、樣品 RNA 的制備

          1. 如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。

          2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

          二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系)

          3. 如果有 N+2 個樣品,則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

          成分

          樣品

          陽性對照

          陰性對照

          5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

          各 4 μL

          4 μL

          4 μL

          口蹄疫病毒通用  RT-PCR 引物混合液

          2μL

          2μL

          2μL

          N+2 個制備的 RNA 樣品

          各12.5 μL

           

           

          超純水 

           

          12.5 μL

           

          口蹄疫病毒通用  RT-PCR 陽性對照 的 100 倍稀釋液

           

           

          12.5 μL

           MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

          4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

          過程

          溫度

          時間

          逆轉(zhuǎn)錄 

          42℃

          30 min

          預(yù)變性

          95℃  

          5 min

          PCR 反應(yīng) (35 個循環(huán))

          95℃ 

          30 sec

          55℃ 

          30 sec

          72

          15 sec

           延伸  72 7 min

          5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、 陽性對照有 122bp 預(yù)期的擴增產(chǎn)物的情況下,才有必要分析樣品的實驗結(jié)果, 如果有擴增產(chǎn)物則為陽性,如果無則為陰性。

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