土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒

Francisella tularensis

產(chǎn)品及特點(diǎn)

土拉熱弗朗西斯菌（Francisella tularensis）會引起土拉桿菌病，又稱野 兔熱，是一種自然疫源性疾病，主要感染野生嚙齒動物并可傳染給其他動物和 人類。感染后的主要表現(xiàn)為體溫升高，肝、脾、腎腫大，充血和多發(fā)性粟粒壞 死，淋巴結(jié)腫大，并有針尖大干酪樣壞死灶，該疾病的傳播會給養(yǎng)殖業(yè)帶來較 大的經(jīng)濟(jì)損失，因此快速檢測具有重要意義。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它 具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增土拉熱弗朗西斯菌.

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑   樣品 DNA。

使用方法一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和 一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要 求的樣品起始量）中加 10μL 斑點(diǎn)叉尾鮰病毒 PCR 陽性對照的 1 萬倍稀 釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。陽性對照 必須有條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實驗無效。對沒有擴(kuò)增 產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染