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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號(hào)	XY-0413	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR試劑盒

Human T-cell Lymphoma Virus Provirus

產(chǎn)品及特點(diǎn)

人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒(Human T-cell Lymphoma Virus，HTLV)是一種致瘤性 RNA 病毒，屬慢病毒亞科，可分為Ⅰ型和Ⅱ型。近來(lái)發(fā)現(xiàn)該病毒在人類可引起多種疾病:Ⅰ型可引起成人 T 細(xì)胞白血病/淋巴瘤、熱帶痙攣性截癱以及其他具有相關(guān)性的脊髓病等;Ⅱ型與 T-多毛細(xì)胞/巨粒細(xì)胞白血病等疾病相關(guān)，兩類病毒都會(huì)對(duì)人體健康造成嚴(yán)重?fù)p害，因此檢測(cè)人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒 DNA 具有重要意義。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒（包括 I 型和 II 型），與其他病毒沒(méi)有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋））
試劑五	天凈沙核酸釋放劑試用裝	20 次（1mL，綠蓋）
試劑六	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲(chóng) DNA 提取試劑盒兼容。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分：

成分	N+2個(gè) 樣品管	PCR陰性對(duì)照	PCR陽(yáng)性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 陰性對(duì)照（水）		18 μL	-
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（人類嗜 T 淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用 PCR 陽(yáng) 性對(duì) 照的 10000 倍稀釋液）	-		18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR反應(yīng) （35個(gè)循環(huán)）	95℃	15 sec
	60℃	60 sec
	72℃	30 sec
后延伸	72℃	10 min

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。