乙型肝炎病毒特異性檢測(cè)

HBsAgGi抗體 & HBsAgGi ELISA試劑盒

◆HBsAgGi HBs抗原的糖鏈異構(gòu)體

本產(chǎn)品是針對(duì)M-HBs的O型糖鏈修飾的PreS2的單克隆抗體，可特異性識(shí)別含有DNA的傳染性病毒顆粒。

關(guān)于乙肝肝炎病毒及HBsAgGi

乙型肝炎病毒（HBV）作為一個(gè)全球性的健康問(wèn)題，是傳染性zui強(qiáng)的病毒之一。

HBV包膜蛋白由三種表面抗原S-、M-和L-HBs組成，它們由含有PreS1、PreS2和S-結(jié)構(gòu)域的HBsAg基因產(chǎn)生¹。 HBsAg被 N-聚糖和 O-聚糖高度糖基化^2,3。全聚糖結(jié)構(gòu)分析顯示，PreS2結(jié)構(gòu)域中，只有在M-HBs上含有基因型C (gC) 中所包含的高度保守的O-糖基化位點(diǎn)，而L-HBs上卻沒(méi)有^4,5。

HBsAgGi，是能與HBsAg的糖鏈異構(gòu)體相結(jié)合的重組單抗，其使用含有O型糖鏈的PreS2糖肽制備所得。與傳統(tǒng)的識(shí)別全部病毒顆粒的HBsAg檢測(cè)相比，HBsAgGi抗體可以特異性識(shí)別傳染性HBV顆粒（DNA病毒粒子）。

產(chǎn)品信息

HBsAgGi Recombinant mouse IgG1, 50μg

HBsAgGi可特異性識(shí)別HBV顆粒中的M-HBsAg

HBV由衣殼蛋白質(zhì)（HBsAg），HBV核心，HBV DNA組成。HBsAg的基因由PreS1（藍(lán)），PreS2（紅），S（黑）三個(gè)領(lǐng)域組成。S-HBsAgs約一半都被N型糖鏈所修飾，其余不含糖鏈。而M-HBsAg的PreS2結(jié)構(gòu)域被O型糖鏈高度修飾，但L-HBsAg在同一位點(diǎn)卻幾乎不會(huì)被修飾。S-HBsAg存在數(shù)量最多，非傳染性顆粒大部分由S-HBsAg所構(gòu)成。而傳染性HBV顆粒內(nèi)核含有HBV DNA，被由所有類(lèi)型的HBsAg所形成的衣殼所包裹。HBsAgGi可特異性的識(shí)別在乙肝分型c型M-HbsAg中所*的O型糖鏈修飾PreS2領(lǐng)域。

HBsAgGi與基于S抗體的HBV顆粒識(shí)別

HBV患者的血清中含有的HBV DNA的傳染性顆粒比非傳染性顆粒要多得多?？筍抗體會(huì)對(duì)包括非傳染性顆粒在內(nèi)的所有HBV顆粒進(jìn)行識(shí)別，而相比之下，HBsAgGi由于是識(shí)別含有M-HBsAg的傳染性HBV顆粒，因此HBsAgGi檢測(cè)不同于S抗體檢測(cè)，可更準(zhǔn)確地識(shí)別HBV患者。

在HBV感染患者的血清中，大部分（超過(guò)99.9%）的HBV顆粒是亞病毒顆粒（SVP），主要是S-HBs。相比之下，感染性顆粒（DNA 病毒粒子）在整個(gè) HBV顆粒中含量比例不到0.1%。HBsAgGi可以從眾多HBV顆粒中，高效區(qū)分含DNA顆粒的糖肽結(jié)構(gòu)（粉色標(biāo)記）。

HBsAgGi 和其他檢測(cè)HBV的標(biāo)志物對(duì)比

下表對(duì)HBV標(biāo)志物進(jìn)行了對(duì)比。qHBsAg和HBV-DNA是傳統(tǒng)標(biāo)志物，而HBcrAg和 HBV-RNA是新型標(biāo)志物。列于表中的是目標(biāo)HBV顆粒或分子。〇代表標(biāo)志物可檢測(cè)的顆粒或分子，×代表無(wú)法識(shí)別此標(biāo)志物，或不推薦使用。

HBsAgGi 可檢測(cè)含有 M-HBsAg 的顆粒，例如 DNA 或 RNA 病毒粒子。

應(yīng)用實(shí)例

使用 HBsAgGi（左）和 PreS2（右）抗體進(jìn)行Western Blot

HBsAgGi-gC（左）可以檢測(cè)出M-HBs但不能檢測(cè)L-HBs。而市售的PreS2抗體（右）對(duì)L-HBs的識(shí)別能力很強(qiáng)，對(duì)M-HBs的識(shí)別能力很弱。在HBV患者的人血清中，HBsAgGi-gC特異性識(shí)別M-HBs，而PreS2抗體識(shí)別M-HBs和L-HBs。

使用HBsAgGi-gC 包被的ELISA板 (RCEK-001) 和重組M-HBsAg 作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行ELISA法檢測(cè)

ELISA板用HBsAgGi-gC包被，用HEK293細(xì)胞中表達(dá)的M-HBs制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。HBV患者的血清(#1-3)經(jīng)稀釋?zhuān)?00 µL中含有2 µL血清）并在同一ELISA板上進(jìn)行測(cè)量。HBsAgGi-gC也可以檢測(cè)NUC處理后的血清樣本(HBV DNA=0)。

使用 HBsAgGi-gC 進(jìn)行免疫沉淀

將HBV顆粒稀釋至1 mL (4.1 logIU/20 μL) 并通過(guò)HBsAgGi-gC沉淀。在這種情況下，HBsAgGi-gC可以收集含有HBV DNA的HBV顆粒。

◆HBsAg糖鏈異構(gòu)體檢測(cè)用HBsAgGi ELISA試劑盒

本ELISA試劑盒含有可檢測(cè)M-HBs的O型糖鏈糖基化修飾PreS2的單抗，可檢測(cè)含有DNA的病毒顆粒。

試劑盒規(guī)格

組成

ELISA使用方法

步驟1：HBV DNA顆粒首先被HBsAgGi抗體捕獲。

步驟2：洗滌后，ELISA微孔上捕獲的HBV顆粒將與HRP標(biāo)記的HBsAgGi抗體進(jìn)一步反應(yīng)。

步驟3：進(jìn)一步洗滌后，將HRP底物（TMB底物）加入孔中。孵育后，停止反應(yīng)并測(cè)量450nm處的吸光度數(shù)值。

標(biāo)準(zhǔn)曲線

將試劑盒中所包含的標(biāo)準(zhǔn)品 M-HbsAg（800ng/mL）梯度稀釋?zhuān){(diào)整為標(biāo)準(zhǔn)M-HBsAg（6.25～400ng/mL）溶液，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。