詳細(xì)介紹
α-突觸核蛋白聚集檢測試劑盒?
(ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kit
α-突觸核蛋白聚集檢測試劑盒模擬在路易體癡呆、帕金森病、多系統(tǒng)萎縮中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞內(nèi)α-突觸核蛋白聚集。
本試劑盒可用于在細(xì)胞培養(yǎng)水平上,檢測目標(biāo)活性物質(zhì)對細(xì)胞聚集的抑制和/或預(yù)防作用。
◆背景
癡呆癥是導(dǎo)致記憶和辨別能力退化的疾病,還沒有*的方 法。經(jīng)過多年的科學(xué)研究證實,許多神經(jīng)變性病(包括癡呆 癥)的大腦退化部位會發(fā)生蛋白凝聚,表明這種聚集的出現(xiàn)與 這些疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。 正常蛋白形式因特定原因形成異常結(jié)構(gòu)并在細(xì)胞中積累時,會發(fā)生蛋白聚集,每種疾病有不同的聚集蛋白。目前已知在帕金森病、路易體癡呆、多系統(tǒng)萎縮病人腦內(nèi),α-突觸核蛋白結(jié)構(gòu)形成異常結(jié)構(gòu)。 α-突觸核蛋白聚集檢測試劑盒模擬細(xì)胞內(nèi)“α-突觸核蛋 白”的聚集情況,可用于在體外篩選活性成分。
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◆試劑盒組成
組成 | 容量 | 規(guī)格 | 保存 |
pCMV-SNCA (α - Synuclein 表達(dá)質(zhì)粒, 紅蓋) (濃度1.25 μg/μL) | 32 μL | 1 小瓶 | 4°C 不凍結(jié) |
pCMV-NC(陰性對照, 綠蓋) (濃度1.25 μg/μL) | 5 μL | 1 小瓶 | |
pCMV-dGFP(dGFP 表達(dá)質(zhì)粒, 藍(lán)蓋) (濃度1.25 μg/μL) | 5 μL | 1 小瓶 | |
20 mM Tris-HCl Buffer (pH 7.4) | 10 mL | 1 瓶 | |
F-αSyn (α - Synuclein 纖維, 黃蓋) (濃度1 μg/μL) | 32 μL | 1 小瓶 | |
Multifectam (基因轉(zhuǎn)染試劑) | 0.33 mg | 1 瓶 |
◆檢測流程
◆實例
一 免疫印跡法Western blotting (使用各種突觸核蛋白抗體)
1、除去培養(yǎng)基。
2、每個孔添加 1 mL PBS, 用移液器收集細(xì)胞。
3、離心 (4,500 rpm [1,800 x g], 5 分鐘,室溫), 收集沉淀。
4、添加 0.1 mL 裂解緩沖液(10 mM Tris-HCl, pH 7.5 含 0.8 M NaCl, 1 mM乙二醇雙(2-胺基乙基醚)-
N,N,N,N-四乙酸 (EGTA), 1 mM DTT 和 1% N-月桂酰肌氨酸鈉), 超聲波混合。
5、離心 (50,000 rpm [100,000 x g], 20 分鐘, 室溫)。
6、添加 40 µL 2 x SDS Buffer (0.125 M Tris-HCl pH6.8, 200 mM 1,4二硫蘇糖醇(DTT), 4% 十二烷基硫酸鈉
(SDS) , 10%蔗糖, 0.01% BPB) 至顆粒中,超聲波混合, 加熱 (100 °C,5 分鐘), 進(jìn)行 10 µL/well 的免疫印跡。
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二 淀粉樣蛋白/物質(zhì)熒光染色試劑盒
使用淀粉樣蛋白/物質(zhì)熒光染色試劑盒(Cosmo Bio,產(chǎn)品編號:CSR-SYN02-COS),可對已發(fā)生聚集的α-突觸核蛋白和核仁進(jìn)行雙重染色。
陰性對照載體(pCMV-NC) | ||
相位圖 | 核染色 | 突觸核蛋白聚集 |
使用α-突觸核蛋白(pCMV-SNCA+F-α Syn) | ||
相位圖 | 核染色 | 突觸核蛋白聚集 |
僅用于研究。不得用于人類基因治療或臨床診斷。
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
CSR-SYN01-COS | (ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kit, 300 tests | 1 kit |
CSR-SYN02-COS | Amyloid Fluorescent Staining Kit, 100 tests | 1 kit |
CSR-SYN03-COS | (ALPHA)-Synuclein Fibrils | 0.1 mg |
CSR-SYN04-COS-C100 | (ALPHA)-Synuclein | 0.1 mg |
CSR-SYN04-COS-M001 | (ALPHA)-Synuclein | 1 mg |
CSR-SYN02-COS | 淀粉樣蛋白熒光染色試劑盒 | 1 kit |