自來水是供給人們生活的直接用水,水中的微生物對人體健康有很大影響。傳統(tǒng)的檢測水中微生物的方法是平皿計數(shù)法,該分析方法其實只能檢測部分微生物(O. K. Vang. ATP measurements for monitoring microbial drinking water quality. Technical University of Denmark, 2013, 16-17),并且需要48h才能得到結果,不能快速反應水質微生物狀況并及時采取改善措施。
三磷酸腺苷(ATP)存在于從微生物到高等動植物所有生物體細胞中,是所有活細胞中主要的能量載體,為細胞代謝提供所需能量。對一種微生物,在一定環(huán)境條件下其ATP含量基本為常量。因此,通過測定ATP含量的多少,可以直接反映微生物的數(shù)量,并且該方法相較于菌落總數(shù)法在操作、耗時以及方便程度上都具有一定的優(yōu)勢。
由于ATP檢測技術操作簡單快速,該方法已經應用于醫(yī)藥衛(wèi)生及食品行業(yè),經過近幾年發(fā)展,該項技術開始應用于水質領域。某大型水務企業(yè)需要對其水廠膜過濾工藝前后的水中微生物進行監(jiān)控,在此情況下,他們試用了ATP 檢測技術,發(fā)現(xiàn)ATP檢測方法可以直接反映膜過濾前后水質微生物總量的不同,幫助判斷水質情況,最終采購了TX1315分析儀及2套ATP試劑。
01
實驗操作步驟
每次進行檢測前使用標準試劑對熒光素酶試劑進行校準,以校準光度計所測得的RLU值與實際 ATP濃度的關系,并確保酶的活性符合實驗要求。
將50mL水樣用0.45μm的濾膜過濾,使水樣中的微生物細胞截留在濾膜上,然后加入1mL裂解液使截留在濾膜上的細胞破裂,釋放細胞中的ATP,再加入萃取液將ATP萃取出來。最后將熒光素酶注入萃取好的待測液使其發(fā)光,再測定發(fā)光度,測定結果以RLUcATP值顯示,水樣中的ATP計算公式如下:
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檢測結果
試用前期分別取2個水廠的原水和出廠水做ATP值的檢測,檢測結果如表1所示。從表1可以看出,原水ATP值一般較高,在37.59~136.42pg/mL范圍內波動,而出廠水的水質較穩(wěn)定,ATP值較低且波動范圍小,出水的ATP值<1.15pg/mL,基本符合ATP指導手冊的建議,即飲用水如良好控制,其ATP應<1pg/mL。
用戶采購TX1315后,做了一些出廠水和管網(wǎng)水的ATP測試,檢測結果如表2所示。對于表2所有水樣,標準偏差為0.355,說明該方法精確度較高,且可以看出出廠水和管網(wǎng)水的ATP 值依舊比較低。
ATP熒光法可以對市政出廠水和管網(wǎng)水中的微生物進行簡便、快速地檢測,并幫助判斷水質微生物的情況。有助于遇到微生物大量滋生的情況時,及時采取控制措施,保證飲用水的安全供應。
ATP技術在水質領域的發(fā)展和運用目前還處于初期階段,且各企業(yè)面對不同的水質情況,也有自己*的工藝路線,因此需要根據(jù)自身情況測試得知ATP的推薦值,為水廠運行提供指導。
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