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          食品快速檢測方法評價技術(shù)規(guī)范

          閱讀:3014發(fā)布時間:2018-8-13

          申貝科學(xué)儀器

          目的

          為保證食品快速檢測方法評價工作科學(xué)合理、標準統(tǒng)一,特制定本規(guī)范。

          適用范圍

          本規(guī)范適用于食品藥品監(jiān)管部門組織開展的食品(含食用農(nóng)產(chǎn)品)中農(nóng)獸藥殘留、非法添加、真菌毒素、食品添加劑、污染物質(zhì)等定性快速檢測方法及相關(guān)產(chǎn)品的技術(shù)評價。

          評價指標

          靈敏度

          特異性

          假陰性率和假陽性率

          與參比方法一致性分析

          評價方法

          低檢出水平(檢出限)設(shè)置對于禁用物質(zhì)或者無殘留*的物質(zhì)應(yīng)小于或者等于參比方法的檢出限水平,對于存在國家標準限值規(guī)定的物質(zhì)應(yīng)小于或等于限值規(guī)定。所有參數(shù)需要在不同種類或者類型的食品中測定的實際結(jié)果進行統(tǒng)計。

          靈敏度

          靈敏度是指方法在實驗條件下達到的實際低檢出水平時,檢出陽性結(jié)果的陽性樣品數(shù)占總陽性樣品數(shù)的百分比,具體計算要求見附表,評價中可描述為該百分比下方法的檢出限。

          特異性

          特異性是指方法在實驗條件下達到的實際低檢出水平時,檢出陰性結(jié)果的陰性樣品數(shù)占總陰性樣品數(shù)的百分比,具體計算要求見附表,評價中可描述為方法檢出限下不存在干擾的百分比。

          假陰性率和假陽性率

          假陰性率是指方法在實驗條件下達到的實際低檢出水平時,陽性樣品中檢出陰性結(jié)果的大概率(以百分比計),具體計算要求見附表,計算結(jié)果為方法大假陰性率的結(jié)果。

           假陽性率是指方法在實驗條件下達到的實際低檢出水平時,陰性樣品中檢出陽性結(jié)果的大概率(以百分比計),具體計算要求見附表,計算結(jié)果為方法大假陽性率的結(jié)果。

          與參比方法一致性分析

          快速檢測方法應(yīng)與方法中規(guī)定的參比方法進行一致性比較。與參比方法一致性分析統(tǒng)計方法常見卡方檢驗,具體可見附表中顯著性差異(c2所示,一般:

          c2=½a-b½-12/a+b

          a:樣品被待確認方法證實為陽性而參比方法檢驗為陰性的數(shù)目;

          b:樣品被待確認方法證實為陰性而參比方法檢驗為陽性的數(shù)目。

          c2<3.84表示待確認方法與參比方法的陽性確證比率在95%的置信區(qū)間內(nèi)沒有顯著性差異。但是如果待確認方法比參比方法存在更高的回收率,則以上兩種方法的陽性確證比率存在顯著性差異是可以接受的。

          c2>3.84表示兩種方法的陽性確認比率在95%的置信區(qū)間內(nèi)有顯著性差異。

          如果能夠證實待確認方法靈敏度優(yōu)于參比方法,則兩種陽性比例的顯著性差異可以接受。

          在考察與參比方法的一致性分析中,也需要考察在檢出限或者報告限度水平附近的檢測結(jié)果與濃度之間的趨勢一致性。

          {C}5 {C}評價步驟

          {C}5.1 {C}擬定評價技術(shù)方案

          在比較快速檢測方法與待評價方法的適用范圍、性能指標和要求等符合性情況的基礎(chǔ)上,評價機構(gòu)應(yīng)針對待評價食品快速檢測方法及相關(guān)產(chǎn)品制定評價方案。應(yīng)包括但不限于:方案實施程序、評價內(nèi)容及依據(jù)、評價比較用參考限值標準及方法標準、參考樣品制備、參考值選擇、參考樣品定值及依據(jù)、參考樣品編碼及說明、測試程序、結(jié)果判斷及統(tǒng)計方式、結(jié)論出具等,終結(jié)論的出具應(yīng)附相關(guān)判別依據(jù),并給出相應(yīng)判別指標。

          盲樣制備

          試驗評價需使用盲樣檢測進行。試驗評價盲樣涉及空白、陰性、陽性樣品等均應(yīng)進行實驗室測定賦值,并出具均勻性和穩(wěn)定性結(jié)果,相應(yīng)盲樣的均勻性和穩(wěn)定性測試結(jié)果計算的重復(fù)性相對標準偏差,應(yīng)為參比方法要求對應(yīng)濃度應(yīng)符合重復(fù)性相對標準偏差的1/3??墒褂糜凶C標準物質(zhì)、參考物質(zhì)或者質(zhì)量控制品等進行溯源參考,測定完成后的各類樣品應(yīng)進行隨機編號處理,形成盲樣。用于試驗評價的盲樣或者質(zhì)量控制樣品,可自行制備,應(yīng)符合:

          1)基質(zhì)符合性和與實際食品樣品所含物質(zhì)成分相似性;

          2)考慮成分存在的濃度水平,應(yīng)涵蓋涉及產(chǎn)品的檢出水平、標準*值(標準規(guī)定值)、對應(yīng)標準的檢出水平等,選擇多個水平進行測定;

          3) 根據(jù)標準方法規(guī)定的食品類別或者評價范圍適用的食品,盲樣制備時應(yīng)重點考慮典型樣品基質(zhì)或相似基質(zhì),結(jié)合相關(guān)食品類別和測定目標物存在形式,按照食品宏觀組分進行區(qū)分,綜合考慮蛋白、脂肪、水分、糖分、高聚物或者多聚體物質(zhì)、色澤、酸堿性等影響檢測的組分進行區(qū)分選擇,必要時應(yīng)按照食品生產(chǎn)工藝制備添加樣品;

          4)對于多種成分檢測,應(yīng)選擇其分析成分進行分類比較(結(jié)構(gòu)類似程度、危害程度等),綜合選擇幾種代表性成分進行評價;對于易于獲得的成分組合,盡可能考慮全部進行試驗評價;

          5)盲樣測定方式按照單位樣品量以及添加目標物的情況,樣品處理可以采用部分樣品、全量處理等方式進行。盲樣必須進行批內(nèi)均勻性檢查,對于一定時間范圍內(nèi)檢測的樣品,需要進行穩(wěn)定性檢查,保證在評價期限內(nèi)樣品穩(wěn)定,以上均需評價機構(gòu)提供檢測報告。

          {C}5.3 {C}試驗測試

          5.3.1 試驗評價可按照方法前期驗證結(jié)果(如有),進行濃度水平和基質(zhì)設(shè)計,應(yīng)比較空白檢測、對照檢測、標準方法平行對照檢測等內(nèi)容,附帶考察方法操作環(huán)境、方法用時、操作難易等情況;對于多檢測規(guī)格產(chǎn)品,應(yīng)根據(jù)其實際規(guī)格制定具體評價濃度范圍和水平,并在結(jié)果判斷中注明適用檢測范圍。

          5.3.2 評價應(yīng)進行雙盲檢測,對待評價食品快速檢測方法和用于比較的參比方法平行利用盲樣進行測試,并對樣品進行平行測定,分別計算獲得平均檢測結(jié)果,用于方法間一致性評價,檢測過程中應(yīng)利用根據(jù)檢測物在食品中實際可能存在的水平,設(shè)置質(zhì)量控制樣品,考察檢測穩(wěn)定性。實驗中測試樣品包括但不限于:

          1) 食品基質(zhì)空白樣品;

          2) 測試水平一般應(yīng)包括標準方法檢出水平(或者標準*值)的0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區(qū)分的水平(不少于3個);或者方法標稱檢出限0.5、1、2倍水平或者其他可檢測區(qū)分的水平(不少于3個);

          3) 依據(jù)相關(guān)分析檢測統(tǒng)計計量要求,一般檢測樣品每種基質(zhì)空白及每個濃度水平不得少于50例,對于非法添加等重點項目的檢測,可考慮在低濃度水平設(shè)置為100例,以便更好地評價出假陽性率和假陰性率;

          4) 如存在或易獲得,應(yīng)進行陽性樣品復(fù)核測試;

          5) 針對多成分方法,每種典型物質(zhì)均需有檢測結(jié)果和相應(yīng)評價參數(shù)結(jié)果;

          6) 應(yīng)給出差異比較結(jié)果,具備數(shù)值的應(yīng)有統(tǒng)計識別結(jié)論,統(tǒng)計方法可根據(jù)實際情況進行設(shè)定,但需說明理由。

          評價結(jié)果及報告出具

          評價結(jié)果

          評價結(jié)果應(yīng)計算快速檢測方法可檢出限度水平的靈敏度、特異性、假陰性率、假陽性率以及檢測結(jié)果與參與方法的一致性。一般可考慮(但不限定)每個基質(zhì)每個濃度水平應(yīng)在數(shù)據(jù)采集數(shù)不少于50例情況下,獲得假陰性率和假陽性率的結(jié)果。食品快速檢測方法技術(shù)評價機構(gòu)應(yīng)根據(jù)項目實際情況給出上述指標評價結(jié)果,并提供具有統(tǒng)計意義的說明。

          報告出具

          **技術(shù)評價機構(gòu)應(yīng)出具技術(shù)評價報告,對評價整體情況和結(jié)果進行匯總整理和分析,報告中應(yīng)有被評價的食品快速檢測方法或相關(guān)產(chǎn)品是否符合國家有關(guān)規(guī)定或產(chǎn)品標稱的結(jié)論。

           

          附表:快速檢測方法性能指標計算表

           

           

          附表

          快速檢測方法性能指標計算表

           

          樣品情況a

          檢測結(jié)果b

          總數(shù)

          陽性

          陰性

          陽性

          N11

          N12

          N1.=N11+N12

          陰性

          N21

          N22

          N2.=N21+N22

          總數(shù)

          N.1=N11+N21

          N.2=N12+N22

          N=N1.+N2.N.1+N.2

          顯著性差異(c2

          c2=½N12-N21½-12/N12+N21),

          自由度(df=1

          靈敏度(p+%

          p+=N11/N1.

          特異性(p-,%

          p-=N22/N2.

          假陰性率(pf-%

          pf-=N12/N1.=100-靈敏度

          假陽性率(pf+,%

          pf+=N21/N2.=100-特異性

          相對準確度,%c

          N11+N22/(N1.+N2.)

          注:

          a由參比方法檢驗得到的結(jié)果或者樣品中實際的公議值結(jié)果;

          b由待確認方法檢驗得到的結(jié)果。靈敏度的計算使用確認后的結(jié)果。

          N:任何特定單元的結(jié)果數(shù),個下標指行,第二個下標指列。例如:N11表示行,列,N1.表示所有的行,N.2表示所有的第二列;N12表示行,第二列。

          C為方法的檢測結(jié)果相對準確性的結(jié)果,與一致性分析和濃度檢測趨勢情況綜合評價。

           


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