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          上海一研生物科技有限公司

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          鳥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用?方法

          閱讀:696      發(fā)布時(shí)間:2022-4-14
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          鳥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法:

          測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

          1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

           12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

           6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

           3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

           1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|

          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

          4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

          6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

          7. 溫育:操作同3。

          8. 洗滌:操作同5。

          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

          中分子量單一蛋白Marker(66 kD)

          中分子量單一蛋白Marker(45 kD)

          中分子量單一蛋白Marker(35 kD)

          中分子量單一蛋白Marker(27 kD)

          植物蛋白提取試劑(帶酶抑制劑)

          真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑(帶酶抑制劑)

          一步法Western專用封閉液

          羊IgG

          小鼠漢坦病毒抗體(HV-Ab)ELISA 試劑盒

          顯影粉

          微量BCA蛋白定量試劑盒

          兔IgG-兔IgG

          鼠IgG-鼠IgG

          藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白Marker

          藍(lán)色預(yù)染高分子量蛋白Marker

          可視型中分子量蛋白Marker

          可視型藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白Marker

          考馬斯亮藍(lán)R-250

          考馬斯亮藍(lán)G-250

          廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker

          甘氨酸

          定影粉

          蛋白銀染試劑盒

          蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSA

          彩虹預(yù)染中分子量蛋白Marker


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