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          目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>> 人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

          人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞
          • 人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞
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          參考價(jià)2600-6000/瓶
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000

          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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          更新時(shí)間:2024-02-05 16:30:37瀏覽次數(shù):517評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x105cells/T25或1mL凍存管
          貨號(hào) EY-XY3211 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          種屬來(lái)源 生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
          形態(tài)特征 梭形、多角形細(xì)胞樣 組織來(lái)源 椎間盤(pán)組織
          人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:土生叢毛單胞菌鲇愛(ài)德華氏菌馬腸鏈球菌食油假單胞菌Corynebacterium guangdongense紅球菌屬代爾夫特食酸菌解拉烏爾菌格氏勒米諾菌產(chǎn)吲哚薩頓菌
          威斯康星米勒菌棉子糖乳球菌淺黃假單胞菌 棲稻假單胞菌人纖維肉瘤人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞人肺癌細(xì)胞株人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞人胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人肺支氣管癌細(xì)胞

          人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

          細(xì)胞基本屬性:

          規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管形態(tài)梭形、多角形細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
          貨號(hào)EY-XY3211種屬來(lái)源
          組織來(lái)源椎間盤(pán)組織生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
          形態(tài)特征梭形、多角形細(xì)胞樣換液頻率每2-3天換液一次



          培養(yǎng)基:人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

          傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          細(xì)胞名稱

          質(zhì)量檢測(cè)人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

          產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管

          培養(yǎng)基人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞專用培養(yǎng)基

          培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

          消化液0.25%

          產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

          運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

          供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

          背景介紹:

          人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)。人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞分離椎間盤(pán)組織;椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周?chē)康睦w維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散,位于椎間盤(pán)的中央,至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長(zhǎng),髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。






          原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):

          原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開(kāi)機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

          (一)組織塊培養(yǎng)法

          許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。

          1. 設(shè)備材料

          培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

          2. 操作步驟

          (1) 在無(wú)菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

          (2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

          (3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

          (4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

          (5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

          (6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中。

          (7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。

          (9) 一般說(shuō)來(lái),若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          QQ截圖20240105153042.png

          操作方法:

          組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))

          材料與儀器

          【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);

          步驟

          1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見(jiàn)前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          楊氏檸檬酸桿菌人惡性黑色素瘤細(xì)胞
          志賀氏菌屬人黑色素瘤細(xì)胞
          弗氏耶爾森菌人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞
          丙酸桿菌人急性淋巴白血病細(xì)胞
          梅氏弧菌人黑色瘤細(xì)胞系
          有毒威克斯菌人肝腹水腺癌細(xì)胞
          莫拉氏菌屬人卵巢腺癌細(xì)胞
          霍利斯格里蒙菌人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
          嗜溫鞘氨醇桿菌人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞
          植物乳球菌人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
          美人魚(yú)發(fā)光桿菌美人魚(yú)亞種人皮膚鱗癌細(xì)胞
          耳炎差異球菌人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
          弗氏檸檬酸桿菌急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞
          殺鮭氣單胞菌日本鮭亞種人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
          Bacillus megaterium人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
          Luteimonas composti人腎腺癌細(xì)胞
          Bacillus firmus人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞
          Acidovorax soli人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞
          Chryseobacterium ureilyticum人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
          Luteimonas marina人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞
          Arthrobacter tecti人涎腺癌細(xì)胞
          Bacillus niaciniCOC1細(xì)胞耐藥亞株
          Arthrobacter niigatensisHela細(xì)胞耐藥亞株
          Bacillus cereus人T淋巴瘤細(xì)胞
          Pseudomonas otitidis人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞
          Streptomyces thermocarboxydus人小腸癌細(xì)胞
          Bacillus magaterium人急性早幼粒白血病細(xì)胞
          Bacillus marisflavi人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞人喉癌上皮細(xì)胞
          Cellulosimicrobium funkei人膀胱移行細(xì)胞癌
          Bacillus flexus人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
          Bacillus subtilis人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞



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