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          目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 小鼠腎足細(xì)胞

          小鼠腎足細(xì)胞
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          參考價(jià)2600-6000/件
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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          更新時(shí)間:2024-02-22 14:32:15瀏覽次數(shù):179評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x105cells/T25或1mL凍存管
          貨號(hào) EY-XY3648 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 生長特性 貼壁生長
          細(xì)胞形態(tài) 不規(guī)則/含足突細(xì)胞 組織來源 腎臟
          種屬來源 小鼠
          小鼠腎足細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
          石蠟切片組織PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
          細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒
          細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
          PDGF-A蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

          小鼠腎足細(xì)胞

          細(xì)胞基本屬性:

          產(chǎn)品名稱

          小鼠腎足細(xì)胞

          組織來源

          腎臟

          種屬

          小鼠

          生長特性

          貼壁生長

          形態(tài)特征

          不規(guī)則,含足突細(xì)胞

          英文名稱

          Glomerular   Podocytes Cells

          貨號(hào)

          EY-XY3648

          規(guī)格

          5x105cells/T251mL凍存管

          質(zhì)量檢測:廣譜角蛋白(PCK)或WT-1Wilm'sTumorProtein)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

          產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T251mL凍存管

          培養(yǎng)基:小鼠腎足細(xì)胞培養(yǎng)基

          培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

          換液頻率:每2-3天換液一次

          消化液:0.25%

          產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

          運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

          供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

          背景介紹:

          腎小球毛細(xì)血管壁構(gòu)成過濾膜。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層結(jié)構(gòu):內(nèi)層為內(nèi)皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細(xì)胞層,上皮細(xì)胞又稱足細(xì)胞,其不規(guī)則突起稱足突,其間有許多狹小間隙,血液經(jīng)濾膜過濾后,濾液入腎小球囊。在正常情況下,血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過而保留于血液中,僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過。腎足細(xì)胞即腎小球上皮細(xì)胞,它附著于腎小球基底膜的外側(cè),連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機(jī)體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞







          原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):

          原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

          (一)組織塊培養(yǎng)法

          許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê唵?,?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。

          1. 設(shè)備材料

          培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

          2. 操作步驟

          (1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

          (2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

          (3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

          (4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

          (5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

          (6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。

          (7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。

          (9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          QQ截圖20240105153042.png

          操作方法:

          組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))

          材料與儀器

          【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);

          步驟

          1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基7A抗體

          組織a-a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒

          鄰氨基卞啶酮(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE

          酵母菌SD-GAL/RAF培養(yǎng)基

          細(xì)胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

          副傷BSalmonella Paratyphi B)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒

          組織總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒

          動(dòng)物組織PATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒

          組織總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量檢測試劑盒

          石蠟切片磷脂皮爾斯(Pearse)間接染色試劑盒

          PH0-2顯色(BRILLIANT GREEN)指示溶液

          載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

          食物檸檬酸比色法定量檢測試劑盒

          非同位素APBCIP/NBTDNA斑點(diǎn)雜交試劑盒

          組織SPHK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C

          線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)

          整合素α3β1抗體

          干擾素調(diào)節(jié)因子1抗體

          熱休克蛋白70家族13抗體

          KLHDC8A蛋白抗體

          氧化酶蛋白6A1抗體

          β淀粉樣肽1-42單克隆抗體

          酪蛋白激酶1γ2抗體

          小鼠腎足細(xì)胞BATF2蛋白抗體


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