目錄:上海一研生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞因子及蛋白 /細胞因子>> 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg |
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貨號 | EY-01X8675 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | Human BMP-2 protein | |
規(guī)格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg | 貨號 | EY-01X8675 |
運輸條件 | 藍冰運輸 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
背景:
骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)是一種細胞外多功能信號細胞因子,也是 TGF-β 家族的成員。BMP-2 可與 TGF-β 受體結合,激活 SMAD 蛋白的信號轉導。此外,它還參與 Wnt 和 Notch 等信號的路徑。BMP-2 在硬骨和軟骨的生長中發(fā)揮著重要作用,并參與成骨細胞的分化。
標記:
1.將細胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標記培養(yǎng)基預熱,然后將150微升2×EdU標記培養(yǎng)基與等體積細胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜。
3.孵育細胞2 h,棄培養(yǎng)基。
【注】:①培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。
實驗步驟:
1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養(yǎng)基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細胞 24 小時。
2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質。
3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當時間(如 6、12、24 或 48 小時)。
4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。
5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時。
6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。
7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。
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