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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2018-12-7 閱讀(2442)
創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙是對嚴(yán)重應(yīng)激因素的一種異常精神反應(yīng)，可由戰(zhàn)爭、社會暴力事件、重大交通事故和自然災(zāi)害等創(chuàng)傷意外引起。其臨床表現(xiàn)多樣化，主要包括創(chuàng)傷經(jīng)歷的再體驗(yàn)、情感麻木與回避行為、警覺增高所致的易激惹等癥候。
1 電刺激大鼠海馬模型(Model of stimulating hippocampus of rats by electricity)
(1)復(fù)制方法 健康大鼠，雌雄不拘，體重為200～220g。
1)埋植電極及電刺激 大鼠經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)或水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)麻醉后固定于立體定位儀上，剪除頭頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域常規(guī)消毒，按大鼠腦圖譜確定海馬CA1區(qū)，無菌操作。牙科鉆于前囟后4.5mm、旁開5.0mm鉆孔，將雙極漆包不銹鋼電極(直徑為0.2mm，尖距為0.1mm)埋植于海馬CA1區(qū)(硬腦膜下5.5mm)。牙科水泥固定電極，術(shù)后連續(xù)肌肉注射慶大霉素5d，每只2萬U/d。動物恢復(fù)1周后開始實(shí)驗(yàn)。電刺激參數(shù)：波寬為1ms、頻率為25Hz、串長為10s、刺激強(qiáng)度為100μA、恒流、單向方波，每天刺激8次，串隔7min，連續(xù)刺激5d。
2)行為學(xué)觀察 觀察后一次電刺激停止后1d、1周及1個月時動物情感行為改變。
驚嚇反應(yīng)：觀察動物接受反復(fù)、短暫(1～2s)高頻金屬音刺激后行為習(xí)性、自主活動及適應(yīng)能力的變化。
曠場活動性：將大鼠輕輕放入曠場行為觀察箱(60cm×60cm×60cm的無頂木盒，箱底用墨線分成36個相等的方格)中央小方格內(nèi)，觀測30s內(nèi)動物的活動情況。計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)：大鼠1/2以上身體從所在方格進(jìn)入相鄰方格計(jì)1分；大鼠后肢性站立計(jì)1分；二者相加為其所得總分。
拒俘反應(yīng)性：以動物從未接觸過的手套輕抓大鼠，觀察其反應(yīng)。記分標(biāo)準(zhǔn)：0：很容易抓取動物；1：尖叫或回避；2：尖叫并回避；3：逃脫；4：逃脫并尖叫；5：咬或試圖撕咬手套；6：主動躍起攻擊。
3)動物行為學(xué)變化
驚嚇反應(yīng)觀察：短暫高頻金屬音刺激時，對照組動物出現(xiàn)1～3s的輕微驚嚇反射，重復(fù)3次以上同樣刺激后很快適應(yīng)。電刺激組動物在電刺激停止后1個月內(nèi)，以同樣高頻金屬音刺激時出現(xiàn)明顯的驚嚇反應(yīng)，表現(xiàn)為全身性驚嚇反射、反應(yīng)幅度增大，持續(xù)時間長(5～10s)，并出現(xiàn)打洞、埋頭、趨暗性等多種躲藏、逃避性焦慮樣行為，且對刺激的適應(yīng)時間明顯延長，反復(fù)刺激6～10次后仍有較明顯的驚嚇反應(yīng)。
情感行為觀察：電刺激停止后1個月內(nèi)電刺激組動物曠場活動性較對照組明顯減少，拒俘反應(yīng)性則顯著增強(qiáng)。
(2)模型特點(diǎn) 此模型以海馬CA1區(qū)為誘發(fā)部位，通過重復(fù)電刺激，誘發(fā)與PTSD臨床表現(xiàn)相似的情感行為障礙。實(shí)驗(yàn)中，要求所施電刺激既可誘發(fā)海馬后放電，以大限度地引發(fā)實(shí)驗(yàn)動物情感行為異常，同時又控制其持續(xù)時間在限度內(nèi)，盡量減少實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)驚厥行為及其他影響因素。另外，數(shù)量的電刺激累積對產(chǎn)生明顯、持續(xù)的情感行為障礙至關(guān)重要。
(3)比較醫(yī)學(xué) 此模型中通過重復(fù)電刺激海馬CA1區(qū)，誘發(fā)了實(shí)驗(yàn)動物明顯的、較長時程的活動習(xí)性改變、警覺水平增高、驚恐行為、環(huán)境適應(yīng)能力下降、躲藏逃避反應(yīng)等多種與人類的PTSD相似的精神、行為異常表現(xiàn)。這顯示了該模型穩(wěn)定性好，誘發(fā)率高，效應(yīng)持久，對動物損害較小，可基本再現(xiàn)PTSD的主要臨床癥狀。
2 加強(qiáng)捕食應(yīng)激模型(Model of intensive predator stress)
(1)復(fù)制方法 健康大鼠，雌雄不拘，體重為200～220g。
1)模型制備 將鼠放入捕食應(yīng)激實(shí)驗(yàn)箱(1m×1m×1m鐵絲籠，中間固定一個20cm×20cm×20cm的小鐵絲籠，以便在實(shí)驗(yàn)中將鼠放入其中，籠中設(shè)一蜂鳴器)的小籠中，在蜂鳴器鳴叫的同時將一只饑餓的貓放入實(shí)驗(yàn)箱中，使貓與鼠無生理傷害性接觸10min后將貓取出。在單純捕食應(yīng)激后1周時重復(fù)上述過程，但蜂鳴后不再放入貓，將鼠在實(shí)驗(yàn)籠中靜置5min。
2)行為學(xué)觀察 觀察捕食應(yīng)激后第3日、第2周及第1個月時行為改變。包括：驚嚇反應(yīng)，曠場活動性和拒俘反應(yīng)性。
(2)模型特點(diǎn) 動物在1個月內(nèi)，在受到同樣高頻金屬音刺激時均出現(xiàn)明顯的驚嚇反應(yīng)，表現(xiàn)為全身性驚嚇反射、反應(yīng)幅度增大、持續(xù)時間長(5～10s)，并出現(xiàn)打洞、埋頭、趨暗性等多種躲藏和逃避性焦慮樣行為，且對刺激的適應(yīng)時間明顯延長，在反復(fù)刺激6～10次后仍有較明顯驚嚇反應(yīng)。曠場活動性減少，拒俘反應(yīng)性則增強(qiáng)。
(3)比較醫(yī)學(xué) 利用動物食物鏈中特殊的捕食關(guān)系，觀察嚴(yán)重心理應(yīng)激對鼠的行為及空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響。本模型通過加強(qiáng)捕食應(yīng)激，誘發(fā)了動物明顯和較長時程的活動習(xí)性改變、警覺水平過高、驚恐行為、環(huán)境適應(yīng)能力下降、躲藏逃避反應(yīng)等多種精神和行為的異常表現(xiàn)。這顯示本模型具有與PTSD相似的致病因素與過程，誘發(fā)效應(yīng)持久，可基本滿足其主要臨床表現(xiàn)，不失為進(jìn)一步研究PTSD致病機(jī)制的較理想的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>
