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詳細(xì)介紹
Zenix體積排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 µm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前上分辨率zui高的體積排阻柱。賽分科技*的表面鍵合技術(shù)保證了填料表面鍵合的zui大化，使其 具有高的化學(xué)穩(wěn)定性及zui小的非特異性吸附。Zenix系列體積排阻柱有100、150及300Å三種孔徑選擇，廣泛的應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離 與分析。
● 3 μm粒徑
● 100、150、300 Å的孔徑選擇
● *的分離效率和分辨率
● 高容量
● 在低和高鹽濃度下有高穩(wěn)定性
● 批間重復(fù)性
● 高的蛋白回收率而不破壞生物活性
● 可忽略的非特異性反應(yīng)
● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒類生物分子能實(shí)現(xiàn)理想的分析和分離
● 自然多聚體（如：多糖）、合成多聚體和納米材料（如：納米顆粒）能夠?qū)崿F(xiàn)理想的分析和分離
zui高的分辨率
開發(fā)小粒徑填料的優(yōu)勢(shì)在于能實(shí)現(xiàn)更高的分離效率和分辨 率。當(dāng)粒徑從5 μm降至3 μm時(shí)，柱效幾乎為原先的兩倍。如圖1和表1所示：當(dāng)填料粒徑從5 μm降至3 μm時(shí)，BSA二聚體、BSA、核糖核酸酶A的塔板數(shù)分別從2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。圖2和表2進(jìn)一步表 明3 μm Zenix柱在分離各種蛋白時(shí)能實(shí)現(xiàn)更高的分離效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm長(zhǎng)的Zenix柱時(shí)能夠達(dá)到40,000的塔板數(shù)。
圖1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分離蛋白混合物A
| 色譜柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
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表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率
峰 | 蛋白 | Zenix 300 | Zenix 300 | SRT 300 |
(4.6x300) | (7.8x300) | (7.8x300) | ||
1 | 甲狀腺球蛋白 | 2180 | 1730 | 1120 |
2 | BSA二聚體 | 4390 | 4600 | 2720 |
3 | BSA | 10280 | 13090 | 6590 |
4 | 核糖核酸酶A | 16490 | 22000 | 11160 |
5 | 尿嘧啶 | 33640 | 38500 | 27860 |
圖2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率 (內(nèi)徑為7.8 mm)
 | 色譜柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm) 流動(dòng)相: 150 mM PBS, pH 7.0 流速: 1.0 mL/min 反壓: Zenix SEC-300為1,375 psi, Zenix SEC-150為1,100psi 溫度: 室溫(~ 23℃) 檢測(cè)波長(zhǎng): 214 nm 進(jìn)樣量: 10 μL 樣品: 1)甲狀腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D.
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表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分離效率
峰 | 蛋白 | Zenix 150 | Zenix 300 |
1 | 甲狀腺球蛋白 | 18050 | 2460 |
2 | BSA二聚體 | 2420 | 5110 |
3 | BSA | 5620 | 13090 |
4 | 核糖核酸酶A | 17600 | 22000 |
5 | 尿嘧啶 | 42000 | 38500 |
高載樣量
載樣量是衡量體積排阻色譜柱性能的重要指標(biāo)之一，下圖表明Zenix系列分析色譜柱在BSA上樣量高達(dá)500 µg的情況下，仍保持著*的分析峰形。
圖3. Zenix SEC-150 色譜柱對(duì)BSA載樣量的測(cè)試圖譜
| 色譜柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
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圖4. Zenix SEC-300 色譜柱對(duì)BSA載樣量的測(cè)試圖譜
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高穩(wěn)定性
賽分科技*的表面修飾技術(shù)使得硅膠表面的鍵合密度達(dá)到 zui大化，從而阻止了能夠促進(jìn)鍵合相脫落的溶劑分子向薄膜內(nèi)側(cè)的擴(kuò)散，保證了其在pH 2-8.5范圍的穩(wěn)定使用。Zenix體積排阻柱適用于大多數(shù)水性及有機(jī)溶劑，包括：醋酸、磷酸、Tris緩沖鹽體系、甲醇、乙醇、THF、DMF、 DMSO等，同時(shí)可耐受高鹽溶液，如2.0 M的NaCl。
流動(dòng)相的兼容性
Zenix SEC固定相能與大多水相緩沖液兼容，如醋酸銨、磷酸鹽、Tris等。Zenix SEC固定相能夠承受高濃度鹽，如2.0 M。同時(shí)Zenix SEC柱在有機(jī)溶劑中，如甲醇、乙醇、四氫呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亞砜等，水和有機(jī)溶劑混合相中均能保持穩(wěn)定。
高蛋白回收率
Zenix SEC固定相為親水性和中性，蛋白和其他生物分子與固定相之間的非特異性吸附可忽略?？梢种频鞍孜降焦枘z固定相表面的作用，從而能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白高的回收率，在分離后能夠保持蛋白的活性。酸性和堿性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能夠高于95%。
Zenix SEC色譜柱技術(shù)參數(shù)表
固定相 | Zenix SEC-80 | Zenix SEC-100 | Zenix SEC-150 | Zenix SEC-300 |
材料 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 |
顆粒大小 | 3 µm | 3 µm | 3 µm | 3 µm |
孔徑 (Å) | ~ 80 | ~ 100 | ~ 150 | ~ 300 |
蛋白分子量范圍 | 100 – 50,000 | 100 - 100,000 | 500 - 150,000 | 5,000 – 1,250,000 |
水溶性聚合物分子量范圍 | 500 – 5,000 | 500-10,000 | 500-25,000 | 1,000-100,000 |
pH 穩(wěn)定性 | 2 –8.5，短時(shí)間可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時(shí)可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時(shí)可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時(shí)可耐pH 8.5-9.5 |
反壓 (for a 7.8x300 mm) | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi |
zui大耐受壓力 (psi) | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 3,500 |
鹽濃度范圍 | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M |
zui高使用溫度 (oC) | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 |
流動(dòng)相的兼容性 | 常規(guī)水相及有機(jī)相溶劑 | 常規(guī)水相及有機(jī)相溶劑 | 常規(guī)水相及有機(jī)相溶劑 | 常規(guī)水相及有機(jī)相溶劑 |