ChromaLink® Digoxigenin One-Shot Antibody Labeling Kit專門設(shè)計(jì)用于將地-高-辛標(biāo)記結(jié)合到抗體上，該試劑盒配有所有必要的成分，可在約90分鐘內(nèi)標(biāo)記和快速定量抗體中摻入的地-高-辛。

地-高-辛長(zhǎng)期以來(lái)被用作鏈霉親和素/生物素系統(tǒng)的替代半抗原報(bào)告系統(tǒng)。這個(gè)系統(tǒng)是基于一種從洋地黃屬植物的花和葉中分離出來(lái)的類固醇，洋地黃是地-高-辛-唯-一已知的天然來(lái)源。因此，針對(duì)地-高-辛生成的高親和力抗體實(shí)際上沒有與高等生物中發(fā)現(xiàn)的其他生物分子發(fā)生交叉反應(yīng)。這種“平行"半抗原報(bào)告系統(tǒng)的特異性和敏感性通常使地-高-辛比基于生物素的檢測(cè)系統(tǒng)更具優(yōu)勢(shì)。最近，這種報(bào)告系統(tǒng)還與生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)一起用于檢測(cè)復(fù)合抗原。

ChromaLink® Digoxigenin One-Shot Antibody Labeling Kit中使用的標(biāo)記方法是基于一種獲得專-利的紫外線可追蹤接頭，稱為磺基苯并二氫吡喃糖苷配基(圖1)。這種先進(jìn)的地-高-辛標(biāo)記試劑含有芳香族水溶性N-羥基-磺基琥珀酰亞胺酯官能團(tuán)(A)，它能有效修飾磷酸鹽緩沖體系中的蛋白質(zhì)賴氨酸殘基。接頭還具有嵌入的雙芳基腙結(jié)構(gòu)(b)，其形成化合物的紫外線可追蹤發(fā)色團(tuán)。這種可追蹤的特征使得附著在抗體上的地-高-辛(c)能夠無(wú)損和直接定量。這些不同的化學(xué)元素通過(guò)長(zhǎng)鏈PEG3間隔物(d)連接在一起，這種間隔物在保持抗體溶解性的同時(shí)保持抗體-地-高-辛結(jié)合親和力。

圖1. ChromaLink Digoxigenin的結(jié)構(gòu)

ChromaLink® Digoxigenin One-Shot Antibody Labeling Kit是將地-高-辛結(jié)合到少量(100ug)抗體中的一種方便、經(jīng)濟(jì)的方法。摻入后，使用無(wú)損紫外掃描(220-400nm)快速定量地-高-辛配基。試劑盒的特點(diǎn)是抗體回收率高(50-80%)，當(dāng)按照指示使用時(shí)，每種抗體的摻入程度或摩爾取代比(MSR)在2-8個(gè)地-高-辛分子的范圍內(nèi)。

圖2. ChromaLink® Digoxigenin One-Shot Antibody Labeling Kit標(biāo)記的過(guò)程。

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