李記生物研發(fā)的EZ Protein系列蛋白電泳產(chǎn)品的克服了在蛋白電泳過(guò)程中，配膠麻煩、電泳耗時(shí)長(zhǎng)、需要反復(fù)調(diào)試凝膠濃度是我們面臨的三個(gè)棘手問(wèn)題。2-5分鐘配膠，濃縮膠、分離膠一次成型；25分鐘恒壓完成電泳；10-250KD蛋白質(zhì)一塊膠即可分離，免去了反復(fù)調(diào)整膠濃度的麻煩。*配方，本產(chǎn)品不添加TEMED，沒(méi)有刺激性氣味，丙烯酰胺用量低，是一款綠色安全的新產(chǎn)品。
使用方法
1. 取2支小燒杯（小試管亦可），在個(gè)小燒杯中加入試劑盒中的EZ Protein anyKD PAGE 濃縮膠A液1.0ml + EZ Protein anyKD PAGE 濃縮膠B液1.0ml；在另一個(gè)燒杯中加入EZ Protein anyKD PAGE 分離膠A液2.5ml + EZ Protein anyKD PAGE 分離膠B液2.5ml；
2. 在5ml 的分離膠溶液中加入10%APS 50ul，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡；
3. 在凝膠模具中灌入適量混勻的分離膠（對(duì)于 mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5cm或距梳齒約0.5cm即可）；
4. 在2ml 的濃縮膠液中加入10%APS 20ul，輕輕攪拌使其混勻后直接灌入凝膠模具中分離膠的上層（不需要等待分離膠凝固）；
5. 將梳子插入凝膠內(nèi)，靜置10~15分鐘，等待濃縮膠聚合；
6. 待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔；
7. 調(diào)整電泳儀為恒壓 300v，進(jìn)行電泳操作，約30min完成蛋白電泳實(shí)驗(yàn)。（300v為絕大多數(shù)電泳儀設(shè)計(jì)可承受電壓，正常使用不會(huì)損壞儀器。如有擔(dān)心可以適當(dāng)降低電壓至250v，對(duì)電泳速度不會(huì)有明顯影響。）
注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒能夠一次性完成濃縮膠和分離膠的制備不會(huì)發(fā)生濃縮膠和分離膠相互混合的情況；
2. 由于本產(chǎn)品具有快速凝膠的特點(diǎn)，在凝膠配制過(guò)程中遵循操作說(shuō)明使用，不要將分離膠灌入凝膠模具后，才開(kāi)始配制濃縮膠（間隔時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致分離膠部分聚合），這樣灌制濃縮膠時(shí)容易引起分離膠與濃縮膠分界面不平，影響電泳效果；
3. 在灌膠過(guò)程中使用小燒杯或者小試管作為配膠容器，按照操作說(shuō)明配制好分離膠和濃縮膠后立即先后將分離膠和濃縮膠灌入凝膠模具中。不建議使用使用移液器緩慢加入可能會(huì)導(dǎo)致分離膠和濃縮膠分界面不平。
4. 需要一次性制備多塊蛋凝膠時(shí)，為防止快速凝膠可以適當(dāng)減少過(guò)硫酸銨的用量；
5. 本產(chǎn)品有針對(duì)性的耐高壓凝膠系統(tǒng)，可以在常規(guī)電泳緩沖液中實(shí)現(xiàn)快速電泳的目的；
6. 如長(zhǎng)期大量使用凝膠，可以用本試劑盒一次性配制多塊凝膠，作為預(yù)制膠，放入加有少量電泳緩沖液的自封袋中，于2-8℃環(huán)境下長(zhǎng)期保存使用；
7. 操作步驟中的凝膠制備是以Mini-gel的規(guī)格制定，如需要制備較大的凝膠可以適當(dāng)調(diào)整試劑的用量；
8. 盡管本產(chǎn)品對(duì)各種原料已做了調(diào)整和修飾，極大的提高了實(shí)驗(yàn)操作的安全性，但是依然含有丙烯酰胺，因此操作時(shí)請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。
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