高保真DNA聚合酶(High-fidelity DNA polymerase)是指一類能夠在較高精度下復(fù)制DNA模板的DNA聚合酶。它們具有較強(qiáng)的3'→5'外切校對(duì)活性,可以在合成的過(guò)程中識(shí)別和更正錯(cuò)誤的堿基,從而降低錯(cuò)誤率。同時(shí),高保真DNA聚合酶還具有良好的耐熱性和耐酸性,能夠在高溫和低pH值環(huán)境下工作,因此被廣泛運(yùn)用于PCR反應(yīng)、DNA測(cè)序等領(lǐng)域。
常見(jiàn)的高保真DNA聚合酶包括Phusion、Pfu、Q5等。其中,Phusion DNA聚合酶是一種由New England BioLabs公司開(kāi)發(fā)的高保真DNA聚合酶,被廣泛運(yùn)用于PCR擴(kuò)增和DNA測(cè)序等實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域。Phusion DNA聚合酶具有高度的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,能夠在復(fù)雜的基因組中擴(kuò)增高GC含量和AT含量的片段,并且能夠在高溫條件下工作,縮短PCR反應(yīng)時(shí)間。
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