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更新時(shí)間:2024-09-01 21:01:14
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活動(dòng)截止時(shí)間:2016年9月30日
李記胎牛血清每一批原材料都經(jīng)嚴(yán)格篩選,經(jīng)過(guò)3次100nm(0.1μm)過(guò)濾,過(guò)濾材料符合美國(guó)FDA文件要求 (21 CFR 211.72),整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程符合胎牛血清生產(chǎn)、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(European Union (EU) Approved)。內(nèi)毒素含量≤5EU/ml,*不含病原性病毒(BVDV, IBRV, BPIV3), 血紅蛋白含量≤0.02%(w/v),批次間質(zhì)量穩(wěn)定,適合于多種細(xì)胞培養(yǎng),也可用于原代細(xì)胞、部分干細(xì)胞的培養(yǎng)。
血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長(zhǎng)激素等及多種生長(zhǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子等);血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。
血清在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中起著多方面的作用可以概括為:①提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子。②補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量不足的營(yíng)養(yǎng)成分。③含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的基質(zhì)成分。④提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。⑤在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護(hù)細(xì)胞不受傷害。⑥給培養(yǎng)液提供良好的緩沖系統(tǒng)。⑦提供蛋白酶抑制劑,保護(hù)細(xì)胞免受死細(xì)胞釋放的蛋白酶的傷害。
李記生物(Life iLab)血清與其他品牌血清部分細(xì)胞測(cè)試數(shù)據(jù)表
血清品牌 | HEK293 | PC12 | ||||||||
Day 0 | Day 2 | Day 4 | Day 6 | Day 0 | Day 2 | Day 4 | Day 6 | |||
李記生物 | CAT:C4055L1050 LOT:1050B5061 | mean | 0.354 | 0.472 | 0.779 | 1.820 | 0.306 | 0.759 | 1.469 | 3.092 |
% | 100.000 | 133.451 | 220.368 | 514.851 | 100.000 | 247.918 | 479.755 | 1009.633 | ||
Biowest | CAT:S1810-500 LOT:020510-UY | mean | 0.353 | 0.472 | 0.795 | 1.940 | 0.301 | 0.744 | 1.456 | 3.185 |
% | 100.000 | 133.640 | 225.212 | 549.575 | 100.000 | 247.465 | 484.206 | 1059.019 | ||
Gibio | CAT:16000-044 LOT:0608759 | mean | 0.364 | 0.472 | 0.764 | 1.756 | 0.309 | 0.780 | 1.488 | 3.192 |
% | 100.000 | 129.602 | 209.821 | 482.280 | 100.000 | 252.304 | 481.083 | 1032.013 |
注:細(xì)胞培養(yǎng)用CCK-8試劑檢測(cè),各組均設(shè)6個(gè)平行樣,計(jì)算均值。
李記胎牛血清注意事項(xiàng):
1.血清儲(chǔ)存和解凍:建議血清保存在-20℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。血清解凍,將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融(建議:融解過(guò)程中不時(shí)規(guī)則地?fù)u晃均勻).
2.如何選擇血清:血清產(chǎn)品因牛個(gè)體、環(huán)境變化批次間存在較大差異,選擇血清產(chǎn)品要看重批次,國(guó)外*有品牌優(yōu)勢(shì),但也不是每批產(chǎn)品都值得信賴。李記血清,每一批次都要進(jìn)行多項(xiàng)指標(biāo)測(cè)試,并由專業(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行十余種養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)后才推向市場(chǎng),我們zui大程度的確保產(chǎn)品批次間穩(wěn)定,提高實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性。
3.哪些原因容易導(dǎo)致血清產(chǎn)生沉淀:1)溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導(dǎo)致沉淀;2)血清放置37℃時(shí)間太久,血清中的不穩(wěn)定成分會(huì)被破壞,導(dǎo)致血清品質(zhì)變差,也會(huì)產(chǎn)生沉淀;3)血清分裝凍存時(shí),注意在不產(chǎn)生氣泡的情況下?lián)u晃均勻,避免因成分不均勻?qū)е虏糠盅宄煞譂舛雀淖儺a(chǎn)生沉淀;4)血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請(qǐng)按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
4.血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。
5.無(wú)血清培養(yǎng)基:無(wú)血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,血清仍然是培養(yǎng)液中zui基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。
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