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          AP15L214-蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel
          • AP15L214-蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel
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          貨物所在地:上海上海市

          地: 上海

          更新時(shí)間:2024-07-24 21:00:06

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          蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel是利用自動(dòng)化灌膠技術(shù)生產(chǎn)的一款非常安全、方便、高質(zhì)量的預(yù)制聚acrylamide凝膠,且兼容市場上主流的電泳槽,可直接用于PAGE電泳及Western blot檢測(cè),節(jié)省大量配膠時(shí)間,電泳時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率。

          蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel

          產(chǎn)品描述
            李記生物的
          蛋白電泳預(yù)制膠 Tris-Glycine gel是利用自動(dòng)化灌膠技術(shù)生產(chǎn)的一款非常安全、方便、高質(zhì)量的預(yù)制聚acrylamide凝膠,且兼容市場上主流的電泳槽,可直接用于PAGE電泳及Western blot檢測(cè),節(jié)省大量配膠時(shí)間,電泳時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率。
            本產(chǎn)品可完美替代Thermo XP00100BOX/XP00102BOX/P10202BOX等產(chǎn)品。
          保存方法
                  常溫下,可存放6個(gè)月;4~8℃下,可存放12個(gè)月;請(qǐng)勿置于0℃以下,以免凝膠發(fā)生凍裂。

          訂購信息

           

          產(chǎn)品編號(hào)濃度孔數(shù)大上樣量包裝分離范圍
          AP15L2144~12%1060 μL10/200~15 KDa
          AP15L2164~12%1530 μL10/200~15 KDa
          AP15L2244~15%1060 μL10/200~10 KDa
          AP15L2264~15%1530 μL10/200~10 KDa
          AP15L2344~20%1060 μL10/200~3.5 KDa
          AP15L2364~20%1530 μL10/200~3.5 KDa
          AP15L2448~16%1060 μL10/200~5 KDa
          AP15L2468~16%1530 μL10/200~5 KDa
          AP15L2548~20%1060 μL10/200~6.5 KDa
          AP15L2568~20%1530 μL10/200~6.5 KDa

          *玻璃膠板尺寸:寬×高×厚度為98×84×4.1 mm;凝膠尺寸為:寬×高×厚度為81×74×1.5 mm;濃縮膠:4%,1.5cm。
          *凝膠中不含SDS, 可用于變性和非變性電泳。
          *均一膠可選濃度:6%、7.5%、8%、10%、12%、15%。
          *梯度膠可選濃度:4~12%、4~15%、4~20%、8~16%、8~20%。也可以提供特殊濃度的定制服務(wù)。 


          使用方法

          1.將Tris-Glycine gel預(yù)制膠從包裝袋中取出,固定在電泳槽中。
          2.按照電泳儀要求加好內(nèi)外槽電泳緩沖液,緩慢地將梳子拔出。
          3.上樣:將處理好的蛋白樣品與loading buffer混合均勻,加熱處理后上樣。
          4.電泳:恒壓180 V, 60 min左右,溴酚藍(lán)指示帶電泳至膠板底部,或?qū)嶒?yàn)預(yù)定位置時(shí),即可結(jié)束電泳。
          5.電泳結(jié)束,取出凝膠。用刀在一側(cè)邊硅膠處,沿著兩片玻璃的縫隙切開封膠材料,即可打開玻璃板(請(qǐng)注意安全,使用帶握柄的刀片)

          注意事項(xiàng)
          1.推薦使用李記生物專門配制的變性Tris-Glycine Running Buffer(Cat.#: AP14L086)或非變性Tris-Glycine Running Buffer (Cat.#: AP14L096)。電泳緩沖液不建議重復(fù)使用,因?yàn)榻?jīng)過電泳之后,緩沖液中的離子強(qiáng)度、緩沖能力都發(fā)生了變化,不能確保電泳效果。
          2.如果需要蛋白條帶更加清晰、平直,可降低電壓至120V-150V, 適當(dāng)延長電泳時(shí)間。
          3.請(qǐng)參考文末的分離譜圖選擇合適濃度的預(yù)制膠,便于進(jìn)行更好的蛋白電泳條帶分離。
          4.該預(yù)制膠可以兼容大部分電泳槽,例如Bio-Rad,北京六一,天能或其它膠板寬度在10 cm的電泳槽。

          預(yù)制膠分離圖譜


           

          常見問題分析及解決方案

           

          常見問題可能原因建議解決方法
          高濃度條帶樣品同時(shí)出現(xiàn)在相鄰泳道樣品量多或加到相鄰條帶降低上樣量,如有溢出,使用緩沖液沖洗上樣孔。
          上樣孔破損移除制孔梳時(shí)加倍小心,如上樣孔破損,換用新凝膠。
          凝膠干縮打開包裝后,盡快進(jìn)行電泳。
          可將凝膠在電泳緩沖液中浸泡一段時(shí)間,
          待凝膠恢復(fù)形狀后上樣。
          蛋白分離效果不佳樣品含鹽量過高使用透析、超濾,或稀釋等方法降低鹽濃度。
          提高電泳緩沖液用量,或使用冰袋對(duì)緩沖液降溫等改善效果。
          電泳時(shí)溴酚藍(lán)帶扭曲
          電泳時(shí)間大幅度延長
          內(nèi)槽緩沖液泄露重新夾一下膠板,防止在電泳過程中內(nèi)槽液面逐步降低。
          上樣孔中有氣泡或殘留凝膠保存緩沖液上樣前,用移液槍吸取緩沖液輕輕沖洗上樣孔,將氣泡吹走。
          樣品蛋白濃度過高使用上樣緩沖液稀釋蛋白樣品
          凝膠安裝不當(dāng),內(nèi)槽漏液檢查內(nèi)槽密封條,墊片等附件是否安裝恰當(dāng)。
          電壓設(shè)置有誤,或電泳緩沖液使用不當(dāng)確認(rèn)凝膠安裝位置,重新安裝凝膠。嚴(yán)格按照本說明書提供配方配置電泳緩沖液。
          電泳后條帶模糊、變黃電泳緩沖液PH使用透析、超濾,或稀釋等方法降低鹽濃度。
          凝膠濃度選擇不當(dāng)根據(jù)凝膠合適分離范圍選用不同濃度凝膠。對(duì)于小分子蛋白的分離,請(qǐng)選用較高分離膠濃度的預(yù)制膠產(chǎn)品。
          蛋白量超出凝膠分離能力提高電泳緩沖液用量,或使用冰袋對(duì)緩沖液進(jìn)行降溫。
          電泳時(shí)泳道拖尾嚴(yán)重
          點(diǎn)樣孔樣品滯留明顯
          樣品裂解處理不充分,
           
          裂解處理不夠充分。建議降低裂解前的樣品濃度,或增加裂解液的比例,使樣品充分裂解。
          Loading buffer處理不充分。Loading buffer處理不充分。建議對(duì)裂解后的樣品進(jìn)行稀釋后,再進(jìn)行l(wèi)oading buffer 處理。
          樣品中含有較大顆粒雜志如細(xì)胞碎片、菌體碎片。高速離心后,取上清液電泳。
          電泳帶呈微笑狀(中間凹陷,兩邊突起)樣品鹽離子濃度或表面活性劑濃度過高稀釋樣品或?qū)悠愤M(jìn)行透析后,再進(jìn)行l(wèi)oading buffer處理和上樣。

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