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產(chǎn)品描述
　　GelRed初由美國Biotium公司研發(fā)，是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設(shè)計(jì)的熒光染料，熒光信號(hào)強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān)，與溴化乙錠（EB）有相同的光譜特性，使用觀察EB的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，染色后的DNA條帶在紫外光透射下呈現(xiàn)紅色熒光。這種新型染料具有不能穿透細(xì)胞膜、與雙鏈DNA的結(jié)合力非常強(qiáng)，基因誘變性低，熱穩(wěn)定性高，對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶沒有抑制作用及適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，得到了市場(chǎng)的廣泛認(rèn)可。該產(chǎn)品適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。
訂購信息

保存方法
　　常溫運(yùn)輸、保存，保質(zhì)期24個(gè)月。
使用方法
1.膠染法（使用方法同EB，電泳前膠染色）
（1）制膠時(shí)按1:10000比例加入GelRed核酸染料（例如：每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液）。由于GelRed具有良好的熱穩(wěn)定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠。
（2）按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2.泡染法（電泳后膠染色）
（1）按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳后，將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的3×染色液（用0.1 M NaCl 溶液稀釋GelRed染液3300倍形成3×染色液，如將15 μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液加入到50 mL 0.1 M NaCl 溶液，該染色液可重復(fù)使用3次，4℃（室溫）避光保存一周）浸沒凝膠。
（2）室溫振蕩染色30 min左右，輕輕搖晃，合適的染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10％丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常介于30 min到1 h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。
3．預(yù)染法（省染料的染色方法，電泳前待測(cè)樣品染色）
（1）該方法適用于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳。
（2）工作液的配制：用電泳緩沖液將10000×的GelRed原液稀釋1000倍，即為10×GelRed工作液。GelRed工作液可以置2~8℃冷藏一個(gè)月以上。
（3）制膠：按常規(guī)方法制膠，不含任何染料。
（4）待測(cè)樣品染色：向分析樣品中加入GelRed工作液和載樣緩沖液，使GelRed工作液的終濃度為1×，室溫放置10分鐘，使GelRed與樣品中DNA充分結(jié)合。
（5）DNA Marker染色：將5 μL DNA Marker和1 μL GelRed工作液混勻，室溫放置5 min，使GelRed與DNA充分結(jié)合。
（6）上樣、電泳：按常規(guī)操作。
注意事項(xiàng)
1. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中，GelRed 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
2. 如果想對(duì)用 GelRed 染過的膠進(jìn)行 Southern blots，建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入 0.1%~0.3% 的SDS。
3. 為了避免染料對(duì)核酸遷移的影響，推薦使用泡染法進(jìn)行染色。
4. GelRed對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
5. GelRed原液在室溫保存，如放置冰箱保存會(huì)產(chǎn)生部分沉淀，使用前適當(dāng)加熱并搖勻即可正常使用。
6. 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度、延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰、改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
相關(guān)試劑推薦
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