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貨物所在地:上海上海市
更新時(shí)間:2024-09-05 14:44:20
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產(chǎn)品描述
高爾基體是大多數(shù)真核細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)囊泡和折疊膜的復(fù)合體,參與分泌和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸。它修飾內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)中內(nèi)置的蛋白質(zhì)和脂質(zhì),并準(zhǔn)備將其輸出到細(xì)胞外。它還在脂質(zhì)在整個(gè)細(xì)胞中的運(yùn)輸和溶酶體的形成中起著重要作用。
Smart Cell NBD 神經(jīng)酰胺高爾基染色試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便,快速的方法,可以選擇性地對(duì)活細(xì)胞或醛固定細(xì)胞中的高爾基染色。將 C6 NBD 神經(jīng)酰胺與牛血清白蛋白(C6-NBD-Ceramide-BSA)形成復(fù)合物給予細(xì)胞。高爾基體通過(guò)形成相應(yīng)的熒光代謝產(chǎn)物而被染色。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
SmartCell神經(jīng)酰胺高爾基體染色試劑盒Green | AC14L313 | 100tests | 3200 |
產(chǎn)品組分
組分 | 數(shù)量 |
組分 A:C6 NBD Ceramide | 1 vial |
組分 B:Staining Buffer | 1 bottle (25 mL) |
組分 C:DMSO | 1 vial (200μL) |
組分 D:Hoechst33342 | 1 vial (50μL) |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存,有效期12個(gè)月。
使用方法
簡(jiǎn)要概述
1.根據(jù)需要處理細(xì)胞。
2.加入 C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液,在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
3.更換染色緩沖液,在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4.使用 FITC 濾鏡套件在顯微鏡下觀察。
5.可選:用 4%甲醛固定細(xì)胞。
溶液配制
1.儲(chǔ)備溶液配制
除非另有說(shuō)明,否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲(chǔ)存在 -20℃ 下,避免重復(fù)凍融循環(huán)。
C6 NBD 神經(jīng)酰胺儲(chǔ)備溶液(100X):將 100 µL的DMSO(組分 C)加入小瓶 C6 NBD 神經(jīng)酰胺(組分 A)中并充分混合。【注】:將未使用的 C6 NBD 神經(jīng)酰胺原液在 -20℃ 保存,避免凍融循環(huán)。
2.工作溶液配制
C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作液:將 10 µL的NBD 神經(jīng)酰胺原液(100X)添加到 990 µL的染色緩沖液(組分 B)中,制成 NBD 神經(jīng)酰胺工作液。
可選:將 10 µL的Hoechst 33342(組分 D)添加到 1mL的NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液中以進(jìn)行核染色。
操作步驟
1. 根據(jù)需要處理細(xì)胞。
2. 直接在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入 100µL的C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液。
3. 在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4. 除去 C6 NBD 神經(jīng)酰胺工作溶液,并用 100 µL /孔的染色緩沖液(組分 B)代替。
5. 在室溫或 37℃ 下孵育 15-30 min。
6. 在裝有 FITC 濾光片的熒光顯微鏡下觀察。
7. 從步驟 4 中除去染色緩沖液,然后向每個(gè)孔中添加 100 µL /孔/ 96 孔板的 4% 甲醛固定緩沖液(未提供)。【注】:對(duì)于非貼壁細(xì)胞,請(qǐng)?zhí)砑铀枇浚ɡ?/span> 2X106細(xì)胞/ mL)的 4%甲醛固定液。(可選)
8. 在室溫下將平板孵育 20-30 min,去除固定劑。用 PBS 洗滌細(xì)胞 2-3 次,然后用 100 µL /孔的染色緩沖液(組分 B)替換。(可選)
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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