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美國(guó)Corning(康寧)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀常見問題
閱讀:1840 發(fā)布時(shí)間:2021-4-21經(jīng)常會(huì)有小伙伴在后臺(tái)或致電400熱線來(lái)咨詢康寧生命科學(xué)的產(chǎn)品或使用方法。為了更有效地幫助大家了解我們的產(chǎn)品、改善產(chǎn)品選擇流程,同時(shí)解決可能出現(xiàn)的問題,我們技術(shù)部小姐姐特地針對(duì)咨詢和疑問較多的產(chǎn)品,整理了一系列常見問題解答。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(貨號(hào)為6749)可計(jì)數(shù)的細(xì)胞大小和濃度范圍是多少?
可計(jì)數(shù)的細(xì)胞大小范圍為4~70 μm,細(xì)胞濃度范圍為5 x 104~1.0 x 107細(xì)胞/mL。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能否對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分?
可以。通過(guò)細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)1:1混合,臺(tái)盼藍(lán)會(huì)將死細(xì)胞染成深藍(lán)色,而活細(xì)胞則不被臺(tái)盼藍(lán)染色。將混合液加入計(jì)數(shù)板中計(jì)數(shù)時(shí),在軟件頁(yè)面選擇“trypanblue, yes (1:1)”, 計(jì)數(shù)儀會(huì)自動(dòng)分析死活細(xì)胞的數(shù)量及比例,并將結(jié)果直接展示在結(jié)果區(qū),該結(jié)果無(wú)需再乘以2。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能否對(duì)細(xì)胞團(tuán)簇進(jìn)行區(qū)分并準(zhǔn)確計(jì)數(shù)?
可以分析含有細(xì)胞簇的樣品。以下是對(duì)于293T細(xì)胞計(jì)數(shù)的測(cè)試圖片供您參考,兩圖中紅圈圈出部分是細(xì)胞團(tuán)簇,右圖中綠點(diǎn)代表檢測(cè)到的活細(xì)胞,紅點(diǎn)代表識(shí)別的死細(xì)胞。
計(jì)數(shù)時(shí),視野中心細(xì)胞清晰,而邊緣細(xì)胞對(duì)焦不清晰,尤其是小于10um的細(xì)胞,是否會(huì)影響計(jì)數(shù)結(jié)果?
由于計(jì)數(shù)儀鏡頭是球形的,在對(duì)焦準(zhǔn)確時(shí),即使邊緣的對(duì)焦不是很清晰,儀器仍然會(huì)對(duì)視野中計(jì)數(shù)范圍內(nèi)(4-70 μm)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。若您對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性有較高的要求,建議您拍攝多張圖片進(jìn)行計(jì)數(shù),軟件可以將多張圖片中的結(jié)果整合取平均數(shù),以提高計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。
如何更好地對(duì)焦, 從而確保計(jì)數(shù)準(zhǔn)確?
為了準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)分析,需要確保對(duì)焦準(zhǔn)確。通過(guò)聚焦旋鈕多次順時(shí)針或逆時(shí)針旋轉(zhuǎn),并且可以進(jìn)一步放大圖像觀察,能夠看到活細(xì)胞有明亮的中心和清晰的邊緣,如下圖所示,左側(cè)圖為未成功對(duì)焦,而右側(cè)圖中對(duì)焦準(zhǔn)確:
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能否對(duì)外周血單核細(xì)胞(PBMC)進(jìn)行計(jì)數(shù)?
可以。PBMC細(xì)胞大小約7-8 μm,符合康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)范圍。在對(duì)PBMC計(jì)數(shù)時(shí),需要注意避免碎片等非細(xì)胞雜質(zhì)被識(shí)別成死細(xì)胞從而影響結(jié)果,因此準(zhǔn)確對(duì)焦非常重要。死細(xì)胞在對(duì)準(zhǔn)焦后呈現(xiàn)出實(shí)心黑點(diǎn)的樣子,如下圖所示,盡可能避免對(duì)焦后有光環(huán)或模糊狀的存在。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用云端平臺(tái),云端賬號(hào)和數(shù)據(jù)是否安全可靠?
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀使用微軟Azure云平臺(tái),符合一系列廣泛的國(guó)際和行業(yè)特定的合規(guī)標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)嚴(yán)格的第三方審計(jì),是安全可靠的網(wǎng)絡(luò)云端平臺(tái)??蛻粢部梢詫?dǎo)出數(shù)據(jù)自行保存到本地之后,刪除云端數(shù)據(jù)。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能夠快速計(jì)數(shù)只需3秒,為什么我計(jì)數(shù)所需時(shí)間更長(zhǎng),不止3秒?
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的特點(diǎn)是快速、準(zhǔn)確,計(jì)數(shù)只需要3秒。需要注意的是,康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用CytoSMART™云計(jì)算應(yīng)用軟件,通過(guò)Microsoft Azure云端計(jì)算平臺(tái)進(jìn)行圖像處理,所以對(duì)于網(wǎng)絡(luò)有一定的要求,無(wú)論是無(wú)線網(wǎng)絡(luò)還是有線網(wǎng)絡(luò),只有網(wǎng)絡(luò)下載速度為70Mbps,上傳速度為20 Mbps時(shí),計(jì)數(shù)時(shí)間才能達(dá)到3秒。細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)間會(huì)隨著網(wǎng)絡(luò)速度的不同而有所差異。此外,若客戶上傳多張照片同時(shí)對(duì)同一樣品進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)時(shí)間也會(huì)隨之延長(zhǎng)。
一定需要匹配Windows 10系統(tǒng)嗎?可否兼容Windows 7或者M(jìn)ac系統(tǒng)?
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀默認(rèn)匹配Windows 10系統(tǒng),與Mac系統(tǒng)不兼容。不建議使用Windows 7系統(tǒng),由于配置不同,可能會(huì)影響計(jì)數(shù)速度。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀數(shù)據(jù)/圖片導(dǎo)出格式有哪些?
數(shù)據(jù)導(dǎo)出可以有Excel表格和Pdf文檔兩種格式;圖片導(dǎo)出有PNG和SVG 兩種格式。
計(jì)數(shù)儀中有配套計(jì)數(shù)板嗎?除了康寧配套的計(jì)數(shù)板,是否還可以適配其他的計(jì)數(shù)板呢?
購(gòu)買康寧計(jì)數(shù)儀配套帶有一塊血球計(jì)數(shù)板(貨號(hào)為 480200)和兩片蓋玻片,可以重復(fù)使用,也可以額外單獨(dú)購(gòu)買。對(duì)蓋玻片的要求是厚度為0.1mm。此外,市面上大多數(shù)的玻璃和塑料細(xì)胞計(jì)數(shù)板也可適用于該儀器,但請(qǐng)您在采購(gòu)前少量測(cè)試其他廠商的計(jì)數(shù)板產(chǎn)品在該儀器上的計(jì)數(shù)表現(xiàn)。
康寧細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在運(yùn)行中出現(xiàn)故障時(shí),我應(yīng)該如何報(bào)修?
若儀器出現(xiàn)故障,請(qǐng)先排查電腦和網(wǎng)絡(luò)是否正常運(yùn)行,儀器與電腦之間的連接是否異常。您可以從以下路徑獲取儀器運(yùn)行記錄文件
文件名:logfile.txt
路徑:
C:\ProgramData\CytoSmartExactNew\logging
*需勾選顯示隱藏文件夾
如果您排查了電腦和網(wǎng)絡(luò)依然不能解決細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的故障,請(qǐng)您聯(lián)系向您出售儀器的經(jīng)銷商,以確認(rèn)該產(chǎn)品是否在一年質(zhì)保期內(nèi)(以您的發(fā)票時(shí)間為準(zhǔn)進(jìn)行核算)。質(zhì)保期內(nèi)的產(chǎn)品會(huì)由經(jīng)銷商寄往我司小儀器授權(quán)維修中心檢查,確認(rèn)問題后會(huì)為您更換一臺(tái)新的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。質(zhì)保期外或是人為原因造成的故障可由您決定是否進(jìn)行付費(fèi)維修。
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