酶標(biāo)儀是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器,酶標(biāo)儀的分類方式一般可以按照濾光方式的不同和功能的不同進(jìn)行劃分。
一。酶標(biāo)儀基于濾光方式的不同可分為濾光片式的酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。
濾光片式酶標(biāo)儀采用濾光片來進(jìn)行波長的選擇,酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長的濾光片來進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后,大部分被過濾,只剩下濾光片本身允許的波長通過,這樣就可就通過濾光片來獲得特定的波長。濾光片輪一般包含4-6塊濾光片,通過選擇不同的濾光片可獲得不同的波長,但是獲得的波長都是固定的,受到一定的限制,不能獲得任意所需的波長,而且更換濾光片價(jià)格比較昂貴。
光柵式酶標(biāo)儀是美國分子儀器公司先發(fā)明使用的(Versamax),雖然才出現(xiàn)短短十年,但是發(fā)展非常迅猛,現(xiàn)在已經(jīng)是主流的酶標(biāo)儀。它采用光柵進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,就可以獲得任意波長的光,波長連續(xù)可調(diào),一般遞增量為1nm.光柵式酶標(biāo)儀使用方便靈活,可以通過軟件選擇任意波長的光,而且可以進(jìn)行全波長的掃描,通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰,從而可以達(dá)到檢測未知樣品的目的,在實(shí)驗(yàn)室中很受歡迎,可以進(jìn)行更多實(shí)驗(yàn)的檢測。因此目前在國內(nèi)的普及程度很高。
二。按照功能的劃分,酶標(biāo)儀可以分為光吸收酶標(biāo)儀,熒光酶標(biāo)儀,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能的酶標(biāo)儀。
光吸收酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系,由此可以用來定性和定量的檢測。光吸收的檢測技術(shù)成熟,成本低,操作簡單,但是動(dòng)態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強(qiáng)。
一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源,而紫外/可見酶標(biāo)儀是可以將兩種光源進(jìn)行切換,適應(yīng)不同測量波長的需求。
熒光酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行熒光的檢測。通過激發(fā)光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會(huì)發(fā)出波長更長的發(fā)射光,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測器。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測,使用方便,檢測模式多樣,但是容易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,干擾檢測。
化學(xué)發(fā)光是來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時(shí)間;閃光型發(fā)光時(shí)間短,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行?;瘜W(xué)發(fā)光中發(fā)出的光子數(shù)與樣品量呈一定比例關(guān)系,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,動(dòng)力學(xué)范圍廣。
多功能酶標(biāo)儀是以上三種酶標(biāo)儀的集合,也是美國分子儀器公司先發(fā)明和生產(chǎn)的(Spectramax M5),它集成了兩種或者三種酶標(biāo)儀于一體,可以同時(shí)進(jìn)行光吸收,熒光和化學(xué)發(fā)光的檢測,功能強(qiáng)大,使用范圍廣,可作為研究平臺(tái),避免了重復(fù)購買。 另外根據(jù)通道的個(gè)數(shù),可以將酶標(biāo)儀分為單通道和多通道兩種類型,單通道又有自動(dòng)和手動(dòng)兩種之分。